临床分子检测参考物质及室内质量控制.pptx

临床分⼦检测参考物质及室内质量控制

李金明国家卫生计生委临床检验中心全国临床分子检测质量保证大会2017.11.9-11.广州

Ø病原微⽣物核酸检测

Ø遗传病基因检测

Ø肿瘤基因突变检测

Ø药物基因组SNP检测؟ŸŸŸŸŸ

临床常⽤的分⼦检测项⺫

Ø荧光PCR方法(扩增阻碍突变系统法(AmplificationRefractoryMutationSystem，ARMS)、PCR-高分辨溶点曲线分析(HRM)、数字PCR等)

ØPCR-杂交法(膜上、芯片[基因芯片]、乳胶颗粒[Luminex])

ØPCR-Sanger测序

ØPCR-焦磷酸测序

ØPCR-新一代高通量测序(NGS)

ØPCR-SSCP、RFLP、dHPLC

Ø基于PCR的微流控芯片

Ø荧光原位杂交

Ø直接杂交

方法

一些其他基因扩增检验方法：TMA、NASBA、LAMP、LCR等。

非扩增的信号放大：

bDNA

Ø采用分子生物学方法(基因扩增、测序、杂交、蛋白质组分析、代谢组学分析等)检测患者体内特定遗传物质的结构或表达水平的变化而做出的诊断。

Ø分子诊断的靶标包括DNA、RNA、蛋白质和小分子代谢物。

分子诊断(Moleculardiagnostics)概念发展

基因组学

转录组学

蛋白质组学

代谢组学

分子诊断的组学概念

ØAcompaniondiagnosticisamedicaldevice,oftenaninvitrodevice,

whichprovidesinformationthatisessentialforthesafeandeffective

useofacorrespondingdrugorbiologicalproduct.Thetesthelpsa

healthcareprofessionaldeterminewhetheraparticulartherapeutic

product’sbenefitstopatientswilloutweighanypotentialseriousside

effectsorrisks.

ØCompaniondiagnosticscan:

uidentifypatientswhoaremostlikelytobenefitfromaparticular

therapeuticproduct;

uidentifypatientslikelytobeatincreasedriskforserioussideeffectsas

aresultoftreatmentwithaparticulartherapeuticproduct;or

umonitorresponsetotreatmentwithaparticulartherapeuticproductforthe

purposeofadjustingtreatmenttoachieveimprovedsafetyor

effectiveness.

uIfthediagnostictestisinaccurate,thenthetreatmentdecisionbasedon

thattestmaynotbeoptimal.

分⼦检测的伴随诊断(companiondiagnostics)概念

/MedicalDevices/.../InVitroDiagnostics/ucm407297.htm

Ø检测试剂⽅法或检测系统是好的：涉及试剂⽅法研发和系统化中的性能确认(validation)

Ø实验室检测过程是可靠的：涉及商品试剂⽅法的性能验证(verification);定量检测的校准；室内质量控制(监测精密度或重复性)和室间质量评价(监测结果可⽐性或准确度)

要实现上述两个基本要素，均离不开⼀种物质，即参考物质(referencematerials)

保证分⼦检测质量的基本要素

Ø具有一种或多种足够均匀、稳定和很好地确定了的定性(如特定DNA

分子序列)或定量(如特定DNA分子丰度)特性,以使作适用于测量过程中的预期用途(校准测定装置、评价测量方法或给材料赋值)的一种材料或物质。

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