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生物技术实践

第34讲微生物的培养和利用

考试说明1.微生物的别离和培养(实验与探究能力)。

2.某种微生物数量的测定(实验与探究能力)。

3.培养基对微生物的选择作用(实验与探究能力)。

4.微生物在其他方面的应用(实验与探究能力)。

ဃ考点一微生物的实验室培养ဃ

1.培养基

(1)概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其生长繁殖的。

(2)营养成分:水、、、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及

的要求。

(3)类型:培养基含凝固剂,培养基不含凝固剂。

2.无菌技术

(1)目的:获得。

(2)关键:防止的入侵。

(3)无菌技术的主要方法及适用对象(连线)

措施操作对象主要方法

a消毒

b.灭菌

Ⅰ.培养基

Ⅱ.接种环

Ⅲ.操作者双手

Ⅳ.培养皿

Ⅴ.无菌室

Ⅵ.牛奶

①灼烧灭菌

②干热灭菌

③巴氏消毒

④紫外线消毒

⑤化学消毒

⑥高压蒸汽灭菌

第1页

3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

(1)步骤:计算→→溶化→→倒平板。

(2)倒平板的过程

①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手。

②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过。

③左手将培养皿翻开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻盖上。

④待平板冷却凝固后,将平板放置,使皿盖在下、皿底在上。

4.纯化大肠杆菌

(1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细

菌菌落。

图11-34-1

(2)平板划线法(图11-34-1中):通过接种环在琼脂固体培养基外表的操作,将聚

集的菌种逐步稀释分散到培养基的外表。

(3)稀释涂布平板法(图11-34-1中):将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液

分别涂布到的外表,进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成

的。

5.菌种的保藏

(1)对于频繁使用的菌种,可以采用法。

(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用法。

1.消毒和灭菌的区别

条件结果

较为温和的物理仅杀死物体外表或内部一局部对人体有害

消毒

或化学方法的微生物(不包括芽孢和孢子)

杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢

灭菌强烈的理化因素

2.两种纯化细菌的方法的比拟

比拟

平板划线法稀释涂布平板法

工程

关键接种环在固体平板培①一系列的梯度稀释

操作养基外表连续划线②涂布平板操作

可以根据菌落的特点

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