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天将降大任于斯人也,必先苦其心志,劳其筋骨,饿其体肤,空乏其身,行拂乱其所为。——《孟子》

副溶血弧菌及其检测方法

1.副溶血弧菌

副溶血性弧菌(又称嗜盐菌VibrioParahaemolyticus)是革兰氏阴性多形态杆菌或稍弯曲

弧菌。本菌嗜盐畏酸,在无盐培养基上,不能生长,3%~6%食盐水繁殖迅速,每8~9分钟

为1周期,低于0.5%或高于8%盐水中停止生长。在食醋中1~3分钟即死亡,加热56℃5~

10分钟灭活,在1%盐酸中5分钟死亡。

副溶血性弧菌食物中毒也称嗜盐菌食物中毒,是进食含有该菌的食物所致,主要来自海

产品或盐腌渍品,常见者为蟹类、乌贼、海蜇、鱼、黄泥螺等,其次为蛋品、肉类或蔬菜。

临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。主要病理变化为空肠及回肠有

轻度糜烂,胃粘膜炎、内脏(肝、脾、肺)淤血等。

已知副溶血弧菌有13种O抗原及65种K抗原,据其发酵糖类的情况可分为5个类型。

各种弧菌对人和动物均有较强的毒力,其致病物质主要有分子量42000的致热性溶血素(TDH)

和分子量48000的TDH类似溶血毒(TRH),具有溶血活性、肠毒素和致死作用。

2.副溶血弧菌的检测方法

(1)溶血性试验

我妻氏用高盐血琼脂培养基,在限定的条件下培养副溶血性弧菌时出现的溶血反应,称

此溶血性能为神奈川现象“”。

此试验要求是用人或兔的新鲜红血球制备高盐血平板,经37℃、24h培养,如在单个菌

落周围呈现透明溶血环或在菌落下面有明显溶血者,为“神奈川现象”阳性,若不出现透明溶

血环或无明显溶血者,为神奈川现象“”阴性。

有致病性的副溶血性弧菌,多数为神奈川现象阳性,但亦有少数为阴性。

(2)血清学试验

副溶血性弧菌有三种抗原,即O抗原(菌体抗原),K抗原(荚膜抗原)及H抗原(鞭

毛抗原),其中血清学分类上有意义的是前两者:O抗原有13种血清群,K抗原有65种血

清型。

进行副溶血性弧菌血清学鉴定时,可用O抗原分群,将18-24h的培养物,用3%食盐

水作成较浓的菌悬液,121℃高压1h或100℃煮沸后,用此菌悬液进行O抗血清玻片凝集

天将降大任于斯人也,必先苦其心志,劳其筋骨,饿其体肤,空乏其身,行拂乱其所为。——《孟子》

试验,同时用无菌生理盐水作对照,如O凝集反应阳性时,可用不经加热的菌悬液进行K

抗血清玻片凝集反应分型判定。

天津生物芯片公司的诊断血清产品覆盖了该菌所有的O血清群及K血清型。

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(3)核酸扩增试验

所有副溶血弧菌分离株都含有不耐热溶血毒素(TLH),这种溶血素是副溶血弧菌所特有

的,因此它的编码基因tlh基因常被用作检测副溶血弧菌的靶基因。而tlh并不是一个毒素

基因,真正与致病相关的是副溶血弧菌的耐热直接溶血素(TDH)和溶血相关溶血素(TRH),

因此它们的编码基因tdh、tlh基因常被用作副溶血弧菌致病性检测的特异基因。

基于此,天津生物芯片推出一系列常规PCR试剂盒及荧光PCR试剂盒。

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