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HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量.pdfVIP

HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量.pdf

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HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量

【摘要】目的建立测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量的方法。

方法采用HPLC法,以甲醇作溶剂、摇床振荡(150r/min)3h提取

洛伐他汀,色谱条件:以甲醇18mmol/L磷酸溶液(体积比为80∶

20)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为237nm。结果洛伐

他汀在5~50μg/mL质量浓度范围内与峰面积线性关系良好,加样

平均回收率为100.75%,RSD为0.87%。结论本方法简便有效,重复

性好,可作为红曲霉相关产品的质量控制方法。

【关键词】高效液相色谱法;红曲霉;洛伐他汀

Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodfor

determiningthecontentoflovastatininfermentationbrothof

Monascus.MethodLovastatincouldbecompletelyextractedfrom

thefermentationbrothbymethanolundershakingfor3hwith

150r/min.Then,sampleswereanalyzedontheHPLCcolumnusing

methanol18mmol/Lphasphate(80∶20)asmobilephaseunderthe

flowrateof1.0mL/min.Thedetectionwavelengthwas237nm.

ResultThemethodhadgoodlinearityovertheconcentrationof

5~50μg/mLforlovastatin.Theaveragerecoverywas100.75%

andRSD0.87%.ConclusionThemethodisconvenient,effectiveand

accurate,whichissuitableforthequalitycontrolofMonascus

products.

1

Keywords:HPLC;Monascus;lovastatin

红曲霉的应用在我国已有近两千年的历史,红曲霉的早期研

究主要集中在其所产的红曲色素和各种酶类,如淀粉酶、葡萄糖淀粉

酶、糖化酶、蛋白酶、果胶酶等,因此早期红曲霉主要用于食品着色、

酿酒、食品发酵等[1,2]。1979年日本学者Endo[3]从红曲霉培养

物中分离筛选出具有降脂作用活性成分MonacolinK(即洛伐他汀,

lovastatin),经临床验证为有效治疗胆固醇血症的高效低毒药物。国

内外学者纷纷开展了红曲霉洛伐他汀发酵的研究,开发红曲系列保健

食品。本文进行了HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀的研究,确定

了最佳色谱条件和简便有效的样品预处理方法,为红曲霉相关产品的

研究开发提供参考。

1仪器与材料

1.1仪器

Waters2695/2996液相色谱仪(empower色谱工作站),primo

R低温高速离心机(德国Sorvall公司),SHZ-82气浴恒温振荡器(江

苏省金坛市宏华仪器厂),十万分之一电子天平(日本岛津)。

2

1.2试剂与试药

洛伐他汀对照品(批号100600-200502,中国药品生物制品

检定所),95%乙醇(分析纯,广州化学试剂厂),甲醇(分析纯,广州

化学试剂厂),甲醇(色谱纯,英国TEDIA公司)。

1.3菌株

安卡红曲霉(Monascusanka)CICC5031,由中国工业微生物

菌种保藏中心保存。

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