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HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量
【摘要】目的建立测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量的方法。
方法采用HPLC法,以甲醇作溶剂、摇床振荡(150r/min)3h提取
洛伐他汀,色谱条件:以甲醇18mmol/L磷酸溶液(体积比为80∶
20)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为237nm。结果洛伐
他汀在5~50μg/mL质量浓度范围内与峰面积线性关系良好,加样
平均回收率为100.75%,RSD为0.87%。结论本方法简便有效,重复
性好,可作为红曲霉相关产品的质量控制方法。
【关键词】高效液相色谱法;红曲霉;洛伐他汀
Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodfor
determiningthecontentoflovastatininfermentationbrothof
Monascus.MethodLovastatincouldbecompletelyextractedfrom
thefermentationbrothbymethanolundershakingfor3hwith
150r/min.Then,sampleswereanalyzedontheHPLCcolumnusing
methanol18mmol/Lphasphate(80∶20)asmobilephaseunderthe
flowrateof1.0mL/min.Thedetectionwavelengthwas237nm.
ResultThemethodhadgoodlinearityovertheconcentrationof
5~50μg/mLforlovastatin.Theaveragerecoverywas100.75%
andRSD0.87%.ConclusionThemethodisconvenient,effectiveand
accurate,whichissuitableforthequalitycontrolofMonascus
products.
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Keywords:HPLC;Monascus;lovastatin
红曲霉的应用在我国已有近两千年的历史,红曲霉的早期研
究主要集中在其所产的红曲色素和各种酶类,如淀粉酶、葡萄糖淀粉
酶、糖化酶、蛋白酶、果胶酶等,因此早期红曲霉主要用于食品着色、
酿酒、食品发酵等[1,2]。1979年日本学者Endo[3]从红曲霉培养
物中分离筛选出具有降脂作用活性成分MonacolinK(即洛伐他汀,
lovastatin),经临床验证为有效治疗胆固醇血症的高效低毒药物。国
内外学者纷纷开展了红曲霉洛伐他汀发酵的研究,开发红曲系列保健
食品。本文进行了HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀的研究,确定
了最佳色谱条件和简便有效的样品预处理方法,为红曲霉相关产品的
研究开发提供参考。
1仪器与材料
1.1仪器
Waters2695/2996液相色谱仪(empower色谱工作站),primo
R低温高速离心机(德国Sorvall公司),SHZ-82气浴恒温振荡器(江
苏省金坛市宏华仪器厂),十万分之一电子天平(日本岛津)。
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1.2试剂与试药
洛伐他汀对照品(批号100600-200502,中国药品生物制品
检定所),95%乙醇(分析纯,广州化学试剂厂),甲醇(分析纯,广州
化学试剂厂),甲醇(色谱纯,英国TEDIA公司)。
1.3菌株
安卡红曲霉(Monascusanka)CICC5031,由中国工业微生物
菌种保藏中心保存。
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