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果蝇杂交试验
【试验目的】
通过试验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律,掌握果蝇杂交的试验技术和基因定位的三点测验措施,在试验中纯熟运用生物记录的措施对试验数据进行分析。
【试验原理】
1.果蝇(fruitfly)是双翅目(Diptera)昆虫,属果蝇属(genusDrosophila),约有3000多种,我国已发现800多种。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食,少部分则只取用真菌,树液或花粉为其食物。以果蝇作为遗传学研究的材料,运用突变株研究基因和性状之间的关系已近一百年,至今,多种研究遗传学的工具已达完善的地步,果蝇对今日的遗传学的发展有其不可磨灭的奉献;从1980年初,Drs.C.Nesslein-Volhard和E.Weichaus以果蝇作为发育生物学的模式动物,运用其完备的遗传研究工具来探讨基因是怎样调控动物体胚胎的发育,也带动了其他模式生物(线虫、斑马鱼、小鼠和拟南芥等)的研究,且有非常详细的成果。
一般用作遗传学试验材料的是黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)。用果蝇作为试验材料有许多长处:
(1)喂养轻易。在常温下,以玉米粉等作饲料就可以生长,繁殖。
(2)生长迅速。十天左右就可完毕一种世代,每个受精的雌蝇可产卵400~500个,因此在短时间内就可获得大量的子代,便于遗传学分析。
(3)染色体数少。只有4对。
(4)唾腺染色体制作轻易。横纹清晰,是细胞学观测的好材料。
(5)突变性状多,并且多数是形态突变,便于观测。果蝇的生活史:
果蝇的生活周期长短与温度有亲密关系。一般来说,30℃以上温度能使果蝇不育或死亡,低温能使生活周期延长,生活力下降,喂养果蝇的最适温度为20~25℃。
生活周期长短与喂养温度的关系
10℃
15℃
20℃
25℃
卵→幼虫幼虫→成虫
57天
18天
8天6天
5天4天
果蝇在25℃时,从卵到成蝇需10天左右,成虫可活26~33天。果蝇的生活史如下:
雌蝇→减数分裂
受精
雄蝇→减数分裂→精子
第一批成虫
羽化(第八天)
(可活26~33天)产第一批卵
蛹(第四天)
第二次蜕皮
(第二天)不
第一批卵孵化(第零天)
第一次蜕皮幼虫
(第一天)
果蝇的生活周期和各发育阶段的通过时间果蝇的性别及突变性状的鉴别:
果蝇的每一体细胞有8个染色体(2n=8),可配成4对,其中3对在雌雄果蝇中是同样的,称常染色体。此外一对称性染色体,在雌果蝇中是XX,在雄蝇中是XY。
果蝇的雌雄在幼虫期较难区别,但到了成虫期区别相称轻易。雄性个体一般较雌性个体小,腹部环纹5条,腹尖色深,第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏,称性梳 (Sexcombs)。雌性环纹7条,腹尖色浅,无性梳。
试验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定,例如红眼与白眼,正常翅与残翅等。而另某些性状可在解剖镜下鉴定,如焦刚毛与直刚毛等。现列表如下:
试验中使用的果蝇突变品系
影响部分
突变名称
基因符号
染色体上座位
翅
残翅
vg
IIR67.0
眼色
白眼
W
X1.5
体色
黑体
b
IIR48.5
刚毛
焦刚毛
sn
X21.0
翅形
小翅
m
X36.1
焦刚毛的基因座为sn3,本文简写为sn。
2.野生型果蝇为红眼、灰身、长翅、直刚毛,与这些性状对应的突变性状诸多,其中灰身(+)与黑身(b)是一对相对性状,且灰身对黑身为完全显性,控制这对相对性状的基因位于第二号染色体上。用品有这对相对性状的两纯合亲本杂交,性状的遗传行为应符合分离定律。
3.黑体果蝇的体色为黑色(b),与之相对应的野生型果蝇的体色为灰色(+),灰
色对黑色为完全显性,控制这对相对性状的基因位于第二号染色体上;果蝇另一突变性状为焦刚毛(sn),与之对应的野生型性状为直刚毛(+),控制这对相对性状的基因位于第一号染色体上,直刚毛对焦刚毛为完全显性。用品有这两对相对性状的纯合亲本杂交,其性状的遗传行为应符合自由组合定律。
4.生物某些性状的遗传常与性别联络在一起,这种现象称为伴性遗传(sex-linkedinheritance),这是由于支配某些性状的基因位于性染色体上。果蝇属XY型生物,共有四对染色体,第一对为性染色体,其他三对为常染色体。雌果蝇的性染色体构型为XX,、雄果蝇为XY。控制果蝇眼色的基因位于X染色体上,在Y染色体则没有与之对应的等位基因。将红眼(+)果蝇和白眼(w)果蝇杂交,其后裔眼色的体现与性别有关。并且
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