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分子生物学
1什么叫分子生物学?它包括哪些内容?
分子生物学(molecularbiology)有广义和狭义之分。
广义的分子生物学是指从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。事实上它包括了生物学的诸多方面。
狭义的分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐明蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控机制的学科,是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘,由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。
分子生物学主要包含以下三部分研究内容:
1.核酸分子生物学
2.蛋白质分子生物学
3.细胞信号转导分子生物学
2DNA的复性
复性:在一定条件下,变性DNA单链间碱基重新配对恢复双螺旋结构,伴有A260减小(减色效应),DNA的功能恢复。
3半保留复制:DNA的复制是将两条亲本链分开,每一条作为合成新链的模板,按碱基配对的规则合成新链,子代DNA的双链中一条是原来的链,另一条是新合成的链,所以称之为半保留复制。
4何谓DNA的半不连续复制?
顺着解链方向生成的子链,复制是连续进行的,这股链称为前导链。
另一股链因为复制的方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长,这股不连续复制的链称为后随链。复制中的不连续片段称为冈崎片段(okazakifragment)。
前导链连续复制而后随链不连续复制,就是复制的半不连续性。
5何谓逆转录?常见的逆转录酶主要有哪些?
逆转录:RNA指导下的DNA合成作用,以RNA为模板在逆转录酶催化下,由dNTP聚合成DNA的作用,新生DNA分子存有RNA基因组的信息。
逆转录酶:又称为反转录酶,为依赖RNA的DNA聚合酶。逆转录酶是多功能酶,有三种酶活性:
1.逆转录活性:即以RNA为模板合成DNA
2.RNase活性:水解RNA:DNA中的RNA
3.DNApol活性:以DNA为模板合成DNA
6遗传重组的类型:
1.同源重组(homologousrecombination);
2.位点特异性重组(site-specificrecombination);
3.转座重组(transpositionrecombination);
4.异常重组(illegitimaterecombination)。
7RecA蛋白
RecA蛋白是催化重组基本反应的酶。RecA有两个主要的功能:诱发SOS反应和促进DNA单链的同化(assimilation)。单链同化是一个分子的单链侵入到另一个分子的双螺旋上,通过取代双螺旋上的原始链而形成异源双链。
8列举原核生物同真核生物转录的差异:
原核生物
真核生物
1、一种RNA聚合酶
1、三种RNA聚合酶
2、不同启动子具相当大的同源性
2、不同启动子的差异大
3、聚合酶直接与启动子结合
3、聚合酶通过转录因子相互作用进行结合
4、没有增强子
4、有增强子
5、转录作用的终止由在几个多聚U前面形成茎环
5、转录的终止是靠转录过程特殊的核酸内切酶切割的序列介导
6、启动子通常位于基因的上游
6、聚合酶III的启动子位于被转录的序列之中
7、转录单位常常含有多基因
7、转录单位只含一基因
9常见顺式操作元件有哪些?
1.结构基因群
操纵子中被调控的编码蛋白质的基因称为结构基因(structuralgene,SG)。一个操纵子中含有2个以上的结构基因,多的可达十几个。各结构基因头尾衔接、串连排列,组成结构基因群。
2.启动子
启动子(promoter,P)是指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。操纵子至少有一个启动子,一般在第一个结构基因5′侧上游,控制整个结构基因群的转录。
3.操纵子
操纵子(operator,O)是指能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列,常与启动子邻近或与启动子序列重叠,当调控蛋白结合在操纵子序列上,会影响其下游基因转录的强弱。
4.调控基因(阻遏物)
调控基因(regulatorygene)是编码能与操纵序列结合的调控蛋白的基因。与操纵子结合后能减弱或阻止其调控基因转录的调控蛋白称为阻遏蛋白(repressiveprotein),其介导的调控方式称为负性调控(negativeregulation);与操纵子结合后能增强或起动调控基因转录的调控蛋白称为激活蛋白(activatingprotein),所介导的调控方式称为正性调控(positiveregulation)。5.终止子
终止子(terminator,T)是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。在一个操纵元中至少在结构基因群最后一个基因的后面有一个终止子。
以上5种元件是每一个操纵子必定含有的。其中
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