2023届高三生物一轮复习课件：-基因工程的工具和操作步骤.pptx

;1.基因工程的理论基础

①不同生物的基因能够拼接的理论基础？

②基因能够在不同生物细胞内表达的理论基础？;1.基因工程的理论基础

[2017全国1卷]DNA为什么能实现不同生物的转移，从结构和功能两个方面进行分析？

DNA双螺旋结构(结构上的可能性)

生物界共用一套遗传密码(功能上可能性);2.基因工程的工具发现

[典例]多种限制酶，DNA连接酶和逆转录酶的发现为___________________________________________创造了条件。

;3.什么是基因工程—P67

[2018海南卷]通常，基因工程操作主要有四个步骤，即目的基因的获取，基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定。因此基因工程含义可以概括为：

__________________________________________________________;4.基因工程的其他内容

①别名:。

②原理:。

③操作对象:。

④操作水平:。

⑤操作环境:生物（体内/体外）进行

⑥结果：。

⑦优点：(1)。

(2)等。;;1.限制性内切核酸酶（限制酶）——分子手术刀;选择性必修3P71“旁栏思考”：

①原核生物中存在限制酶的意义是什么？

原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全，防止外来病原物的危害。

②限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？

限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰（甲基化），使限制酶不能将其切开。

;[单酶切和双酶切]应该选择什么限制酶？;选择性必修3P75：

③在切割含目的基因的DNA片段和质粒分子时应选取_____________，若选取不同限制酶，也应保证切割两种DNA分子时_________________________。

实际操作时，常选取两种限制酶切割目的基因的DNA片段和质粒分子的，其优点是。

④获取一个目的基因需限制酶切割______次，共产生____个游离的磷酸基团;2.DNA连接酶——“分子缝合针??

①作用：将限制酶切割下来的DNA片段拼接成DNA分子。

②类型;2.DNA连接酶——“分子缝合针”

P72“旁栏思考”：DNA连接酶和DNA聚合酶

①DNA连接酶连接的是，而DNA聚合酶是把单个____________连接到已有的DNA片段上（DNA复制）。

②起作用时需要以一条DNA链为模板，而不需要模板。

;3.载体

1)化学本质：DNA分子

2)种类：质粒（经人工改造，常用）、

λ噬菌体衍生物、动植物病毒等

;;[双标记基因题型：2016年新课标I卷]某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。有人将此质粒载体用SamI酶切后，与用SamHI酶切获得的目的基因混合;目的基因;2）如果用含有氨苄青霉素的培养基

进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞

中，未被转化的和仅含有环状目的基

因的细胞是不能区分的，其原因是

______________；并且______________和

____________的细胞也是不能区分的，

其原因是____________。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有是____________的固体培养基。

;[思考]如何使棉花植株具有抗棉铃虫的特性？

目的基因的获取，

基因表达载体的构建，

将目的基因导入受体细胞，

目的基因的检测与鉴定;1.获取目的基因;;1.获取目的基因;2.DNA复制所需条件？

①模板

②原料

③酶

④能量

⑤引物

⑥mg2+;;①变性：温度上