2024年高二生物知识点总结.doc

高二生物选修3知识點自我检查与總結归纳

专題1?基因工程

基因工程的概念

基因工程是指按照人們的愿望，進行严格的设计，通過体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，发明出更符合人們需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上進行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

（一）基因工程的基本工具

1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）

（1）重要是從原核生物中分离纯化出来的。

（2）功能：可以识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两個核苷酸之间的磷酸二酯键断開，因此具有专一性。

（3）成果：經限制酶切割产生的DNA片段末端一般有两种形式：黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶

(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：

①相似點：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将單個核苷酸加到已經有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两個DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运送車”——载体

（1）载体具有的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保留。

②具有一至多种限制酶切點，供外源DNA片段插入。

③具有標识基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、构造简朴的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

（3）其他载体：噬菌体的衍生物、動植物病毒

(二)基因工程的基本操作程序

第一步：目的基因的获取

1.目的基因是指：编码蛋白质的构造基因。

2.原核基因采用直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用措施有反转录法_和化學合成法_。

3.PCR技术扩增目的基因

（1）原理：DNA双链复制

（2）過程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物結合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶從引物起始互补链的合成。

第二步：基因体現载体的构建

1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因可以体現和发挥作用。

2.构成：目的基因＋启動子＋终止子＋標识基因

（1）启動子：是一段有特殊构造的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和結合的部位，能驱動基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

（2）终止子：也是一段有特殊构造的DNA片段，位于基因的尾端。

（3）標识基因的作用：是為了鉴定受体细胞中与否具有目的基因，從而将具有目的基因的细胞筛选出来。常用的標识基因是抗生素基因。

第三步：将目的基因导入受体细胞_

1.转化的概念：是目的基因進入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和体現的過程。

2.常用的转化措施：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的措施是农杆菌转化法，另一方面尚有基因枪法和花粉管通道法等。

将目的基因导入動物细胞：最常用的措施是显微注射技术。此措施的受体细胞多是受精卵。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作為受体细胞的原因是繁殖快、多為單细胞、遗传物质相對较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化措施是：先用Ca2+处理细胞，使其成為感受态细胞，再将重组体現载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下增進感受态细胞吸取DNA分子，完毕转化過程。

3.重组细胞导入受体细胞後，筛选具有基因体現载体受体细胞的根据是標识基因与否体現。

第四步：目的基因的检测和体現

1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上与否插入了目的基因，措施是采用DNA分子杂交技术。

2.另一方面還要检测目的基因与否转录出了mRNA，措施是采用用標识的目的基因作探针与mRNA杂交。

3.最终检测目的基因与否翻译成蛋白质，措施是從转基因生物中提取蛋白质，用對应的抗体進行抗原－抗体杂交。

4.有時還需進行個体生物學水平的鉴定。如转基因抗虫植物与否出現抗虫性状。

（三）基因工程的应用

1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，运用转基因改良植物的品质。

2.動物基因工程：提高動物生長速度、改善畜产品品质、用转基因動物生产药物。

3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因体現产物发挥作用。

（四）蛋白质工程的概念

蛋白质工程是指以蛋白质分子的构造规律及其生