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血小板输注无效原因与解决思路

血小板作为正常人外周血中最小的有形成分，在血栓和止血、伤口修复、炎症和癌症的

发展中发挥着重要的生理功能［１］。造成血小板计数减少的主要原因包括血液系统疾病引

起的病理性减少［２］及体外因素导致的假性减少［３］。临床上对血小板计数过低的血液

病患者多采取血小板输注的方法，以降低出血风险［４］。血液病合并多抗凝剂依赖的血小

板假性减少十分罕见，若未及时发现并纠正血小板计数易引发临床过度医疗。本文通过分析

１例急性白血病患者血小板反复输注无效的原因，探寻多抗凝剂依赖情况下血小板聚集的应

对策略。

１资料与方法

１．１一般资料

患者，男，６８岁，因反复发热半月，发现全血细胞减少１０ｄ前往当地医院就诊。查

体：重度贫血貌，言语含糊，双下肢轻度水肿，右侧肢体肌力４级，余未见明显异常。完善

相关检查，结合骨髓细胞形态学、分子生物学及细胞遗传学检查提示急性髓系白血病伴ＢＣ

Ｒ－ＡＢＬ基因阳性。预备接受化疗前患者血常规结果提示贫血、血小板计数减少，临床遂

予以血小板输注，但效果不佳，血小板计数始终维持在２０×１０９／Ｌ左右。治疗期间患

者并无出血表现，为明确血小板输注无效原因至上海交通大学医学院附属瑞金医院就诊。

１．２仪器和试剂

ＢＣ－６８００ＰＬＵＳ全自动血细胞分析仪及配套试剂购自深圳迈瑞生物医疗电子

股份有限公司；ＸＮ－９００００全自动血细胞分析仪、ＳＰ－１０推染片机及配套试剂购

自日本希森美康株式会社。０．１ｇ／ｍＬ阿米卡星注射液购自上海信谊金朱药业有限公司；

乙二胺四乙酸二钾（ＥＤＴＡ－Ｋ２）抗凝真空采血管、枸橼酸钠抗凝真空采血管、肝素抗

凝真空采血管购自碧迪医疗器械（上海）有限公司。

１．３方法

１．３．１标本采集及制片采集患者ＥＤＴＡ－Ｋ２、枸橼酸钠和肝素抗凝血标本，分

别于采集后即刻、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ、４ｈ使用推染片机制作外周血涂片，镜检观察

血涂片中血小板形态及分布情况。１．３．２血小板估算方法肝素抗凝标本采集后立即涂片，

计数体尾交界处２０个油镜视野下红细胞和血小板的数量。血小板估算结果＝（镜下血小板

计数／镜下红细胞计数）×血细胞分析仪红细胞计数。重复３次取平均值。１．３．３血小

板计数ＢＣ－６８００ＰＬＵＳ全自动血细胞分析仪使用光学法（ＰＬＴ－Ｏ通道）进行血

小板计数；ＸＮ－９００００全自动血细胞分析仪使用电阻抗法（ＰＬＴ－Ｉ通道）进行血

小板计数；采用核酸荧光染色法（ＰＬＴ－Ｆ通道）进行血小板计数。１．３．４阿米卡星

血小板解聚试验在ＥＤＴＡ－Ｋ２抗凝血中加入一定量阿米卡星注射液，使终浓度达到

６．５ｍｇ／ｍＬ。分两种方法加入。方法一：采血后立即加入，在即刻、３０ｍｉｎ、１

ｈ、２ｈ、使用仪器ＰＬＴ－Ｉ通道及ＰＬＴ－Ｆ通道分别计数血小板；方法二：在采血后

即刻、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ分别加入阿米卡星，混匀后静置１０ｍｉｎ，使用仪器ＰＬ

Ｔ－Ｉ通道及ＰＬＴ－Ｆ通道分别计数血小板。不同抗凝标本在不同仪器检测通道中的血小

板计数结果：在不加阿米卡星的前提下，使用仪器ＰＬＴ－Ｉ通道、ＰＬＴ－Ｏ通道及ＰＬ

Ｔ－Ｆ通道对ＥＤＴＡ－Ｋ２、枸橼酸钠和肝素抗凝血标本的血小板进行计数，检测时间点

设为采集后即刻、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ、４ｈ。１．４统计学处理采用ＳＰＳＳ２２．０

软件对数据进行处理和分析，组间比较采用Ｗｉｌｃｏｘｏｎ秩和检验，以Ｐ＜０．０５为

差异有统计学意义。

２结果

２．１不同抗凝标本各时间点外周血涂片镜检结果

ＥＤＴＡ－Ｋ２与枸橼酸钠抗凝标本采集后即刻涂片，镜下可见大量血小板聚集；肝素

抗凝标本采集后即刻涂片，镜下见血小板散在分布，少量聚集。３０ｍｉｎ后３种抗凝剂在

各时间点均可观察到血小板成片聚集。证实患者存在多抗凝剂依赖的血小板假性减少。见图

１。

２．２血小板估算结果

肝素抗凝血采集后即刻涂片，计数体尾交界处２０个油镜视野下红细胞和血小板的数量

分别为１８４０个和３８６个，仪器红细胞计数结果为１．６４×１０１２／Ｌ。根据上述

公式可得血小板估算结果为３４４×１０９／Ｌ。重复３次取平均值，该患者血小板估算结

果为３４０×１０９／Ｌ，略高于正常参考区间。

２．３阿米卡星血小板解聚试验

在采血后立即加入阿米卡星，并在不同时间点使用仪器ＰＬＴ－Ｉ通道及ＰＬＴ－Ｆ通

道进行检测，结果显示血小板计数无明显变化。在采血后不同时间点加入阿米卡星，并使用

仪器ＰＬＴ－Ｉ通道及ＰＬＴ－Ｆ