负荷尿核黄素测定实验报告.pdfVIP

负荷尿核黄素测定实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除负荷尿核黄素测定实验报告

篇一：实验六负荷尿中核黄素的测定

实验六负荷尿中核黄素的测定

（荧光法）

（一）目的意义

尿中核黄素排出量测定是评价人体核黄素营养状况的一种方法，

包括负荷试验和核黄素肌酐比值测定。

（二）原理

含有核黄素的溶液在紫外线下发黄绿色荧光，在稀溶液中荧光强

度与核黄素浓度成正比。核黄素又可被低亚硫酸钠还原而失去荧光，

故测定还原前后的荧光强度可去除干扰性荧光物质的影响。

（三）仪器与试剂

1．荧光光度计

2．酸性水取浓硫酸0.3ml，加蒸馏水至200ml。

3．核黄素标准储备液精密称取25mg核黄素于1000ml容量瓶

中，用酸性水稀释至刻度，移至棕色瓶内，冷藏备用。

4．核黄素标准应用液吸取上液4ml，用酸性水稀释至100ml。临

用时配制。

5．低亚硫酸钠（na2s2o4）

（四）操作步骤

1．样品取尿样lml加酸性水19ml于一具塞试管内，混匀，在激

发波长420nm和发射波长530nm处测定荧光强度。记下读数（A）

后，取10mg低亚硫酸钠直接加人比色杯内，摇匀，立即测定荧光强

度并读数（b）。

2．内标准取尿样1.0ml加核黄素标准应用液1.5ml，加酸性水

17.5ml，混匀，在同样情况下测定荧光强度，记下读数（c），取

10mg低亚硫酸钠直接加入比色杯内，摇匀，立

即测定荧光强度并读数（D）。

（五）结果计算

（六）说明

1．所有操作需在暗室内进行。

2．作内标准的目的是除去尿样中可能存在的有荧光的

物质。

3．使用荧光光度计是需用荧光红钠校正。

荧光红钠溶液的配制：溶解25.0mg荧光红钠

（sodiumfluorescein）于少量水中，搅拌使其溶解后加水

至250ml，此液为储备液。取储备液0.25ml加水稀释成250ml，

为工作液。

校正步骤：现选择所需激发波长和发射波长，校正仪器零点，然

后以荧光红钠工作液校正荧光计使指针在某一刻度，在测定样品的荧

光强度。

4.如遇尿样混浊，难以直接读数，可将尿液按食品中核黄素测定

方法稀释后，过硅镁层析柱再进行测定。

篇二：实验三尿药法测定核黄素片剂消除速度常数

实验三尿药法测定核黄素片剂消除速度常数

一、实验目的

1、熟悉尿药法在生物药剂实验中的应用。

2、掌握尿药法在计算消除速度常数等动力参数的方法。

二、实验原理

药物在体内的吸收、分布、代谢、等过程中既有区别，又有联系，

观察一个方面的变化，常可间接地认识另一方面的情况，所以药物在

体内的速度过程变化规律，既可用血药法来估算，也可用尿药法来估

算。在多数情况下，尿药浓度高于血药浓度，定量分析精密度好，测

定方法较易建立，而且取样方便，受试者可免受多次抽血的痛苦。因

此，在体内药物大部分以原形从尿中排除条件下，通常可用尿药法估

算消除速度常数、生物半衰期等动力学参数。尿中原形药物的瞬时排

泄速度，可用下列微分式表示：

dxudt

Kex

（1）

Ke为表现一级排泄速度常数，xu为t时间尿中原形药物的累计排

泄量，x为t时间体内存有的药。

在静脉给药时，体内药量经时过程可由下式表示：x?xo（2）

xo为给药剂量，K为表现一级消除速度常数。将（2）式x值代入

（1）式后得：

dxudt

Kexoe

k