高考生物一轮总复习 课时验收评价(五十三)重点研究“基因工程操作中限制酶的选择和PCR技术”.pdf

课时验收评价（五十三）重点研究“基因工程操作中限制酶的选择

和PCR技术”

1．为增强玉米抗旱性，研究者构建含有某微生物抗旱基因E的重组质粒，用农杆菌转

化法转入玉米幼胚组织细胞中，获得抗旱的转基因玉米。下列相关叙述不正确的是()

A．提取该微生物mRNA逆转录为cDNA，通过PCR可获得大量目的基因

B．将重组质粒置于经CaCl处理的农杆菌悬液中，可以获得转化的农杆菌

2

C．用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞需要严格进行无菌操作

D．用E蛋白的抗体进行抗原—抗体杂交，可在个体水平检测转基因玉米的抗旱性状

解析：选D用E蛋白的抗体进行抗原—抗体杂交，可在分子水平检测转基因玉米的抗

旱性状，D错误。

2．(2022·抚顺二模)如图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图(↓表

示切点)。下列相关分析错误的是()

A．这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端

B．不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同

C．能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割

D．同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等

解析：选D能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割，但能被限制酶1切割的DNA

不一定能被限制酶3切割，故同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数不一

定相等，C正确，D错误。

3．(2022·济南模拟)现有重组质粒甲(共含2686个碱基对，不含TDNA)和乙(共13400

个碱基对)，为避免基因反接，研究人员用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重组质粒甲、乙，再利用所得

片段构建了重组质粒丙(如图所示)，然后采用农杆菌转化法将丙导入胡萝卜愈伤组织细胞。

VP

培养后得到转1基因胡萝卜植株。将重组质粒甲、乙和丙进行分组，每组只含其中一种重

组质粒，同时用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割，哪一组是切割重组质粒丙的结果()

A．只得到含有2146和540个碱基对的2种DNA片段

B．只得到含有540和12400个碱基对的2种DNA片段

1

C．只得到含有12400和1000个碱基对的2种DNA片段

D．只得到含有540和13400个碱基对的2种DNA片段

解析：选B由题意知，重组质粒甲含有2686个碱基对，若只得到含有2146和540

个碱基对的2种DNA片段，则是切割重组质粒甲的结果，A错误；由A项分析可知，限制酶

Ⅰ切割可产生540个碱基对，那另外的12400个碱基对片段，则是同时用限制酶Ⅰ和Ⅱ切

割，B正确；重组质粒乙共13400个碱基对，若只得到含有12400和1000个碱基对的2

种DNA片段，则是切割重组质粒乙的结果，C错误；若得到含有13400个碱基对的DNA片

段，说明重组质粒乙未被限制酶识别并切割，D错误。

4．(2022·泰安模拟)限制酶的发现为DNA的切割和功能基因的获得创造了条件。限制

SauEcoBam↓↓↓

酶3AⅠ、RⅠ、HⅠ的识别序列及切割位点分别为GATC、GAATTC、CGATCC。含

SauEcoBam

某目的基因的DNA片段如图所示，若利用质粒A(含限制酶3AⅠ、RⅠ、HⅠ的酶切

位点各1个)构建基因表达载体，为克服目的基因和质粒A的自身环化以及目的基因与质粒

的任意连接等。下列对限制酶的选择，正确的是()

EcoBam

A．用限制酶RⅠ或HⅠ处理含某目的基