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先天下之忧而忧，后天下之乐而乐。——范仲淹
Biacore检测Fcɣn效应分子和IgG相
互作用的操作方法
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先天下之忧而忧，后天下之乐而乐。——范仲淹
目录
一、实验目的：
二、实验试剂和耗材.
三、实验步骤.
（一）、仪器准备.
（二）、样品稀释.
（三）、样品检测过程.
（四）、实验结果分析.
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先天下之忧而忧，后天下之乐而乐。——范仲淹
BiacoreT200检测Fcɣn效应分子与IgG结合操作指南
一、实验目的：
利用Biacore检测Fcɣn效应分子与IgG结合的动力学数据K、K及亲和力
ad
数据K。抗原Fcɣn分子量为43.5KD，商业化蛋白带有His标签；IgG分子量
D
为150KD。本实验利用NTA芯片捕获Fcɣn，IgG分子作为分析物检测Fcɣn与
IgG结合的动力学数据和亲和力数据。
二、实验使用机型、试剂和耗材
1、本实验所用的机型为：BiacoreT200。
、2S系列NTA芯片及试剂盒（试剂盒内含有0.5mMNicl2溶液和350mM
EDTA）。S系列NTA芯片货号：BR-1004-07（一片装），BR-1000-34（三片
装）；NTA试剂盒货号：28-9950-43。购买地均为GEHealthcare。
、缓冲液：310×pBS-P+pH7.4（货号：28-9950-84）；购买地为GE
Healthcare。
、去离子水（用40.22uM膜过滤过）。
、配体5Fcɣn：如果为商业化蛋白粉末，用水稀释到100ug/ml或200ug/ml，
分装在-20℃保存。推荐使用：Sinobio，无论使用哪家的Fcɣn，客户需要确
定Fcɣn的活性，在进行溶解时，确保溶解液中不含Tris。
、6IgG：母液IgG浓度至少在1.5mg/ml，样品体积在200ul以上纯度90%
以上（即跑SDS胶有两条带）。如果IgG中的盐离子浓度或多糖浓度
过高可进行脱盐，如果体积小于500ul选择GEHealthcare的PDMiniTrapTM
G-25，货号为如果体积小于1ml选择货号为的GE
Healthcare的PDMiniTrapTMG-25；如果体积在1.75-2.5mL选择GE
Healthcare的PD-10Deasalting，货号为
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先天下之忧而忧，后天下之乐而乐。——范仲淹
、其他耗材：无盖61.5mlEP管（货号：BR-1002-87）、96孔板（货号：
BR-1005-03）、2型橡胶盖（货号：BR-1004-11）、96孔板封口膜（货号：
28-9758-16），购买地均为GEHealthcare。
三、实验步骤
（一）、仪器准备
1、开机操作
1)打开BiacoreT200系统和电脑的电源开关。BiacoreT200的电源开关位于系
统背面的
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