流式细胞术在白血病中的应用.ppt

**************第32页,共53页，星期六，2024年，5月*TCRVβ克隆第33页,共53页，星期六，2024年，5月*小结流式细胞术有助于血液系统异常疾病的诊断更加确定的诊断排除其他疾病有助于细分亚型更准确的原始细胞辨别和定量有助于预后判断治疗后监测快速第34页,共53页，星期六，2024年，5月*免疫表型分析与FAB分型基于不同的参数对白血病进行分型，两者的结果可一致或不一致；对有些病例，尤其是髓系白血病亚型，免疫表型分析并非特异；对于复杂的病例，需结合多种检查，如特异性染色体核型分析或融合基因综合判断。第35页,共53页，星期六，2024年，5月*MRD背景目前由于多种化疗药的联合应用，使多数白血病患者可以获得形态学的完全缓解（CR）。但多数患者不能维持长期缓解，仍有相当多的患者再次复发。复发的主要原因是患者体内存在少量的形态学难以辨认的残存白血病细胞。如果能够准确检测患者体内残存的白血病状态，可以有的放矢地进行治疗，使患者避免许多不必要的痛苦。第36页,共53页，星期六，2024年，5月*MRDOutlineofLeukemicDiagnosisMorphology:1-5%,Cytogenetics:1-5%,Flowcytometry:0.1-0.01%,RT-PCR:0.01-0.001%CRPrimaryleukemiaOSChemotherapiesAutoSCTAlloSCTInductionLeukemiccells1012 1010109108107≤106100% 1% 0.1%0.010.001 第37页,共53页，星期六，2024年，5月*第38页,共53页，星期六，2024年，5月*MolecularMeasurementsofTreatmentResponse—ClinicalApplication(2008ASHEducationProgramBookp367) Application Action检测治疗早期的反应佳 加强治疗检测治疗早期的反应差 无需加强治疗 检测复发 加强治疗，准备HSCT HSCT前MRD评估 优化HSCT的时间HSCT后MRD评估 调整免疫抑制治疗时间，等临床试验结束时的MRD评估 评价新的抗ALL药物或治疗的结果 第39页,共53页，星期六，2024年，5月*MRD与预后当残存白血病细胞10-2，3年复发率为76-94%10-3残存白血病细胞10-2,3年复发率为37-53%残存白血病细胞10-3,3年复发率为8-20%残存白血病细胞10-4,3年无复发第40页,共53页，星期六，2024年，5月*各种MRD检测方法检测残存白血病细胞的主要依据是在患者发病时找到患者的特殊表现，包括遗传学、分子生物学以及免疫学的特征。这些特征往往是正常血细胞所没有的，因此可利用这些标志鉴别正常细胞与异常细胞，特异地检测残存白血病细胞。评价这些方法的有效性及应用性主要依据该方法的特异性、敏感性、简单性、重复性和速度。FCM免疫表型、FCMDNA倍体、PCR、FISH是较好的方法。第41页,共53页，星期六，2024年，5月*MRD流式分析原则违背正常分化模式诊断时辨别出背离正常发育阶段的免疫表型相对特异的抗原组合随访辨别出不同于正常免疫表型的不连续群体以诊断的免疫表型作为出发点第42页,共53页，星期六，2024年，5月*免疫表型异常适合MRD检测ALL95%儿童ALL90-95%成人ALLAML85%儿童AML80-95%成人AML第43页,共53页，星期六，2024年，5月*报告模板第44页,共53页，星期六，2024年，5月*病例一AML病例资料：女，3岁，2009.