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以糖蜜为碳源的酿酒酵母培养基的优化 .pdf

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以糖蜜为碳源的酿酒酵母培养基的优化

陈雪;甄玉国;赵小丽

【摘要】以甜菜糖蜜为碳源,通过摇瓶试验,在单因素试验基础上,进行正交试验设

计,对酿酒酵母的培养基进行了优化.最终确定酿酒酵母的液体培养基优化配方为糖

蜜添加量8%,尿素添加量0.05%,磷酸二氢钾添加量0.05%.在此条件下的培养基

产酿酒酵母菌干质量为7.67g/L,比培养基优化前提高了23.3%.

【期刊名称】《中国酿造》

【年(卷),期】2014(033)004

【总页数】4页(P35-38)

【关键词】甜菜糖蜜;酿酒酵母;培养基;优化

【作者】陈雪;甄玉国;赵小丽

【作者单位】吉林农业大学动物科学技术学院吉农博瑞奶牛研发中心,吉林长春

130118;吉林农业大学动物科学技术学院吉农博瑞奶牛研发中心,吉林长春130118;

长春博瑞饲料集团有限公司技术中心,吉林长春130114;吉林农业大学动物科学技

术学院吉农博瑞奶牛研发中心,吉林长春130118

【正文语种】中文

【中图分类】TS261.1

酵母菌(yeast)不是一个分类单位,其属于子囊菌亚门中的酵母菌科和半知菌亚

门中的芽孢纲,菌体为单一细胞,主要以芽殖方式进行无性繁殖[1]。酵母培养物

(yeastculture,YC)是指在特定工艺条件下由酵母菌在培养基上经过充分的厌

氧发酵后形成的微生态制品,主要由酵母细胞外代谢产物、经发酵后变异的培养基

和少量无活性的酵母细胞构成[2]。

酵母菌生长主要受碳源、氮源、生长因子和无机离子等培养基组分的影响。传统培

养基质大多用价格较高的酵母粉和蛋白胨,糖蜜作为制糖厂的废料,价格低廉,来

源广泛。甜菜糖蜜是糖厂的副产品,可发酵性糖的含量一般为30%~60%,除此

之外,还含有一定的可发酵性氮、多种无机盐及维生素,是酵母生产中比较理想的

碳源[3]。以甜菜糖蜜为主要碳源,以期获得较高酿酒酵母(Saccharomyces

cerevisiae)生物量的培养基配方,为将来优选酿酒酵母的培养及酵母饲料工业化

生产提供参考依据。

1.1材料与试剂

1.1.1原料

酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae):动物科学技术学院实验室分离保存。

甜菜糖蜜:黑龙江依安糖厂。

葡萄糖、磷酸二氢钾、尿素、硫酸铵、硫酸镁、氯化钠、氯化钙(以上均为分析

纯):北京化工厂;蛋白胨(总氮≥14.5%,酵母浸粉:总氮≥9%):北京奥博星

生物技术有限公司。

1.1.2培养基

斜面培养基:葡萄糖20g/L,蛋白胨20g/L,酵母浸粉10g/L,琼脂15g/L。

液体培养基采用酵母浸出粉胨葡萄糖(yeastextractpeptonedextrose

medium,YPD)培养基:葡萄糖20g/L,蛋白胨20g/L,酵母浸粉10g/L)用于

种子液培养[4]。

1.2仪器与设备

pHS-2C型数字式酸度计:上海SANXIN公司;UV-1201分光光度计:日本岛津

公司;Eppendorf5810R高速冷冻离心机:德国艾本德股份公司;YP1200型电

子天平:上海精科实业有限公司;HYG-C型培养摇床:上海欣蕊自动化设备有限

公司。

1.3试验方法

1.3.1菌种活化与种子液制备

无菌条件下接1环保藏菌种至YPD斜面培养基进行划线,30℃静置培养48h复

苏菌种。

取复苏后的菌种,用接种环取1环活化后的斜面菌种转接到种子培养基中于30℃、

180r/min条件下培养24h(装液量100mL/250mL)。

1.3.2分析方法

菌液浓度采用比浊法测定:用紫外可见分光光度计以不接入菌液的培养基作为对照,

测定菌液在波长560nm处的光密度值OD560nm值[5]。

测定菌体干质量采用干重法测定:发酵液在5000r/min条件下离心10min,蒸

馏水洗涤2次后收集菌体,105℃烘干至质量恒定,称质量并记录数据[6]。

1.3.3试验菌株生长曲线测定

斜面保存的菌种用接菌环挑取1环于YPD培养基中,装液量200mL/500mL,在

温度30℃、180r/min的条件下培养,每隔2h取样,在波长560nm

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