高效液相色谱法分析和制备黄芪中的黄芪甲苷含量 .pdfVIP

高效液相色谱法分析和制备黄芪中的黄芪甲苷含量

张文敬;张倩;张涛;穆祥;胡格

【摘要】[目的]本试验利用高效液相色谱法分析和制备黄芪水煎液中的黄芪甲苷并

通过质谱对收集到的组分进行鉴定.[方法]分析型色谱条件为色谱柱为EcliPseXDB-

C18(150mm×4.6mm,5μm)柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.8

mL/min,检测波长254nm,进样量20μL.制备型色谱条件为色谱柱为Hypersil

C18(20mm×300mm,10μm)柱,流速10mL/min,进样量2mL,其他同分析型色

谱.质谱分析法为电喷雾离子化(electrosprayionization,ESI)源,源电压3.5kV,正、

负离子检测,鞘气(N2)流速80a.u.,辅助气(N2)流速15a.u.,碰撞气体为氦气,毛细管

温度350℃,毛细管电压±5V.采用全离子扫描方式,扫描范围50～2000m/z.[结果]

经分析型色谱得标准曲线回归方程为A=0.1717C+0.4657,r=0.9996,在0.01～

0.2mg/mL范围内线性关系良好.制备型色谱方法得到的峰型较好,峰间隔适当,能

够将相邻组分分离.收集保留时间为26min的组分,经分析型色谱和ESI-MSn鉴定

该组分为黄芪皂甙Ⅳ(astragalosideⅣ),即黄芪甲苷,且纯度可达95％.[结论]该方

法精密度高、稳定性可靠、重现性好、加样回收率高,收集到的成分准确,纯度高,适

用于黄芪中黄芪甲苷的分析和制备.

【期刊名称】《北京农学院学报》

【年(卷),期】2016(031)003

【总页数】6页(P80-85)

【关键词】黄芪;黄芪甲苷;高效液相色谱法

【作者】张文敬;张倩;张涛;穆祥;胡格

【作者单位】北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验

室,102206北京;北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验

室,102206北京;北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验

室,102206北京;北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验

室,102206北京;北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验

室,102206北京

【正文语种】中文

【中图分类】R284.1

中药黄芪(RadixAstragali)是豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根，味甘性微温，

具有益气固表，补气养血，利水消肿，脱毒，敛疮生肌等功效[1]。研究表明，黄

芪具有增强免疫力、促进机体cAMP代谢、改善心功能、降压、保肝、调节血糖、

抗菌及抑制病毒等多种药理作用。

黄芪作为传统中药，在中药的配伍及保健品中使用非常频繁，由此生产的中草药及

保健食品非常丰富。黄芪的化学成分复杂，主要含皂苷类、黄酮类、多糖类以及氨

基酸类等[2,3]。黄芪甲苷是黄芪的主要活性成分之一，也是黄芪总苷的主要成分

[4]，其结构式如图1所示。黄芪总皂苷的含量是以黄芪甲苷为标准品测定。迄今

为止，有关测定黄芪甲苷的方法有薄层扫描法、比色法等，其中薄层扫描法已载入

药典[1]。在实际试验中发现，上述分析制备方法预处理步骤较多，受试验软硬件

的影响大，重现性差。本试验建立适合于测定黄芪水煎液中黄芪甲苷含量的高效液

相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)。该方法精密度高、

稳定性强、重现性好。

1.1仪器和试剂

分析型HPLC(Waters2695高效液相色谱系统，Waters2998二极管阵列检测器，

Empower工作站)，制备型HPLC(VarianPrepModel215型泵，Alltechuvis

200型检测器)，四极杆质谱仪(G1956B)。

乙腈、甲醇为色谱纯(购自德国Merck公司)，甲酸、冰醋酸为分析纯(购自北京化

工厂)，膜荚黄芪(购自北京同仁堂药店)，黄芪甲苷对照品(购自中国药品生物制品

检定所，批号0781-200311)。

1.2方法

1.2.1色谱条件分析型色谱条件：色谱柱，EcliPseXDB-C18：(150mm×4.6

mm，5μm)；流动相，乙睛(A)-水(D)梯度洗脱：0min(5%