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液相色谱仪常规分析操作步骤及规程

1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。

2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3)．打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接

检测系统。

4)．进入HPLC控制界面主菜单。

5)．有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，

直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀。

6)．调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越

大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，走基线，观察基线的情

况。

7)．设计走样方法。可以选取现有的各种走样方法或建立一个新的方法。一个

完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject

转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。

8)．进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过

滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再

用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。

9)．关机时，先关计算机，再关液相色谱。

10)．填写登记本，由负责人签字。

注意事项：

1)．流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动

尽量不引起气泡。

2)．柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。

3)．所有过柱子的液体均需严格的过滤。

4)．压力不能太大，最好不要超过2000psi。