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英雄者,胸怀大志,腹有良策,有包藏宇宙之机,吞吐天地之志者也。——《三国演义》
动物组织标本制作技术及注意事项
动物组织标本制作技术
第一章:取材及固定
一、动物致死法
1、麻醉法
第二章可将浸有乙醚或氯仿的棉球连同小动物一起密封于钟罩或
有盖玻璃瓶内进行麻醉;也可用4%戊巴比妥作静脉注射,剂量按动物
体重1ml/kg;或用20%氨基甲酸乙脂作腹腔注射,剂量一般按动物体
重5ml/kg。
2、空气栓塞法
如家兔可用50ml注射器将空气由耳静脉推入,使动物很快死亡。
3、击头法
如大、小鼠,可用重物击头后部或将其头后部猛撞桌沿,最好一
击而死。
4、断头法
青蛙、小鼠等小动物,可用剪刀剪去其头部,较大动物如兔子等,
可用斧头迅速砍头致死。
5、股动脉放血法
动物经吸入乙醚或氯仿稍麻醉后,立即切开股动脉放血。
注意:上述各法,应根据制片需要选用,如空气栓塞法不宜用作
血管注射标本的制作;乙醚麻醉对丘脑下神经部分泌物染色标本不利;
股动脉放血法有利于肠系膜铺片的制作。
二、取材注意事项
1、材料新鲜
最好是动物心脏还在跳动时取材,立即投入固定液内,脏器的上
皮组织最易变质,应争取在死后半小时内处理完毕。
2、组织块力求小而薄
组织块的厚度以不超过5毫米为宜,较理想的厚度为2毫米左右,
主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入组织块内部。
英雄者,胸怀大志,腹有良策,有包藏宇宙之机,吞吐天地之志者也。——《三国演义》
3、勿使组织块受挤压
切取组织块时刀剪要锋利,不要来回挫动,夹取组织时切勿猛压,
取材时组织块可稍大,以便固定后修块。
4、尽量保持组织的原有形态
新鲜组织经固定后,或多或少产生收缩现象,为此可将组织展平,
以尽可能维持原形。
5、要熟悉取材部位
要能准确的按解剖部位取材,如胰腺,一般取胰岛较多的胰腺尾
部;肺应取有细支气管及带有软骨片的小支气管部。
6、动物品种的选择
如观察肥大细胞,以大、小鼠皮下组织及肠系膜、大网膜铺片为
佳,欲观察运动终板,可用小鼠的肋间肌等。
7、选好组织块的切面
熟悉某些器官组织成分安排,然后决定其切面的走向;如一长管
状器官以横切面较好。
8、保持材料的清洁
组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用生理盐水
冲洗,然后再入固定液,但要注意防止组织损伤。9、切除不需要的部
分
特别是组织周围的脂肪等,应尽可能清除掉,否则给固定、脱水、
浸蜡、切片等带来一些不必要的问题。
三、组织固定法
(一)、固定的方法
1、小块组织固定法:从人体和动物取下的小块组织,立即置入液
态固定剂中进行固定,这是应用最广泛最经常的方法。
2、注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗
入内部或需要对整个脏器或整个动物进行固定。这时宜采用注射固定
法,将固定液注入血管,经血管分支到达整个组织和全身,从而得到
充分的固定。
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