Waters2487型高效液相色谱仪操作规程 .pdf

题目Waters2487高效液相色谱仪操作规程

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目的：规范Waters高效液相色谱仪（2487检测器、515泵）操作规程，确保仪器的正

常操作和检测结果的可靠性。

范围：适用于本公司Waters高效液相色谱仪（2487检测器、515泵）的操作

职责人：操作人员。

规程：

1仪器的组成

Waters2487是由输液泵、手动进样器、色谱柱、2487紫外检测器、柱温箱和色谱数据

处理系统组成。

2操作前的准备

2.1准备好流动相，换上色谱柱用Peek接头拧紧。

2.2操作

2.2.1开启电脑，打开HS2000色谱数据工作站（通用版），打开通道A。

2.2.2按打开仪器各部件电源开关（515泵、柱温箱、2487紫外检测器，2410示差检测

器），约5分钟后，紫外检测器通过自检，LCD面板显示【Ready】，可进行排气操作。

2.2.3泵排气：排液阀逆时针180度，在515泵LCD面板按▼选择到PURGE出现，按

【Run/Stop】，开始排气泡，5分钟后自动停止，排液阀顺时针180度拧紧，在LCD面板

按▲选择到FLOW。

2.2.4设置流速

按【Edit/Enter】至光标出现在需改动的数字位置上，用“▼”或“▲”键增加或

减少数字，流速设定后按【Menu】，存贮设定值

2.2.5设置温度

在示差检测器的LCD面板上，按【2nd/Func】和【Purge/9】切换到温度界面（面

板左上角指示灯亮），按【2nd/Func】和【Set℃/4】，然后输入设定温度，按【Enter】

确定。

2.2.6设置波长

等2487紫外检测器通过自检后，输入数字键，按【Enter】确定波长。

2.2.7运行

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按【Run/Sotp】，则泵开始运行,即可进行平衡及实验操作。

2.2.8数据处理

点击【文件】选择【打开】选择需要处理的图谱，处理完毕，按【文件】下拉菜

单的【打印】，即打印图谱。

2.3冲洗和关机

2.3.1、流动相如果有缓冲盐，先用20%甲醇水冲洗以1mol/min流速冲洗60分钟，然后

再用有机溶剂如甲醇或乙睛，用1.0ml/min流速冲洗60分钟，如无缓冲盐则直接用有

机溶剂冲洗。

2.3.2冲洗进样阀流动相如果有缓冲盐，吸取20%甲醇水约10ml冲洗进样口3次，然

后再吸取有机溶剂如甲醇或乙睛约10ml冲洗进样口3次，如无缓冲盐则直接用有机溶

剂冲洗。

2.3.3停泵，将Waters2487、Waters515、Waters2410面板右下角的电源开关扳到“OFF”，

即将仪器关闭。

2.4填写仪器使用记录。

3维护保养和注意事项

3.1色谱柱的出口端与检测器之间应为无死体积连接，以免试样扩散影响分离。

3.2新柱或被污染柱用适当溶剂冲洗时，应将其出口端与检测器脱开，避免污染。

3.3使用的流动相应与仪器系统的原保存溶剂能互溶，如不互溶，则先取下上次

的色谱柱，用异丙醇冲洗过渡，进样器和检测器的流通池也注入异丙醇进行过渡，过渡

完毕后，接上相应的色谱柱，换上本次使用的流动相，再操作。

3.4压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析，应检查泵中气泡是否已排除，

各连结处有无漏液，排除故障后方能进行操作。如压力升高，甚至自动停泵，应检查柱

端有无污染堵塞。

3.5发现记录基线波动，出现毛刺等现象，首先应考虑检测器流通池中是否有气

泡或污染，如不是流通池引起，可等待氘灯稳定，同时检查仪器的接地是否良好，必要

时，换上新的氘灯，仪器稳定后方能进行操作。

3.6进样前，色谱柱应用流动相充分冲洗平衡，如系统适用性不符合规定，或填充剂已

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损坏，则应更换新的同类色谱柱进行分析，由于同类填充剂的化学键合相的键合

度及性能等存在一定差异，往往依法操作达不到预定的分离时，可更换另一牌号的同类

色谱柱进行试验。

3.7以硅胶作载体的化学键合相填充剂的稳定性受流动相pH值的影响，使用时，应详

细参阅色谱柱说明书，在规定的pH值范围内选用流动相，一般的pH值范围为2~8

使用高pH值流动相