Cell discovery（IF=38）：北京大学科研团队揭示金属蛋白酶妊娠相关血浆蛋白A的结构及调节机制.pdf

Celldiscovery（IF38）：北京大学科研

团队揭示金属蛋白酶妊娠相关血浆蛋白A的

结构及调节机制

研究背景

胰岛素样生长因子（IGF）是生长的关键调节因子，尤其是在胎儿发

育期间。IGF包含IGF-1和IGF-2，对应两种受体IGF-1R和IGF-2R，

以及IGF结合蛋白（IGFBPs）。IGFBPs是IGF活性主要调节剂的载

体蛋白。IGF对IGFBPs的亲和力高于IGF-1R，因此，在细胞外环境

中，大多数IGF与IGFBPs结合，IGFBP-3在人血清中最为普遍。IGF

还可结合胰岛素受体（IR）。

IGF信号通路概述（源自参考文献）

IGF信号通路严格调控，其中循环和组织相关的IGF被IGFBPs隔离。

IGFBPs蛋白水解，释放IGF，使其与IGFRs结合，并进行下游信号传

导。人体内IGF的释放由蛋白酶介导，包括妊娠相关血浆蛋白PAPP-A

和PAPP-A2。

PAPP-A（Pregnancy-associatedplasmaprotein-a）是一种锌金属

蛋白酶，广泛用于孕早期唐氏综合征筛查中，但其具体生物学功能及

机制长期未知。PAPP-A以两种主要形式存在。在怀孕期间，PAPP-A

以两个分子的PAPP-A与两个分子的嗜酸细胞主要基本蛋白（proMPB）

共价连接的形式循环。在这种2:2的异源四聚体复合物中，PAPP-A

是没有蛋白溶解作用的。

作为一种关键的生理病理分子，PAPP-A及其下游的IGF信号通路成

员是怀孕和癌症中很有前途的诊断生物标志物和治疗目标。PAPP-A

的活性由proMBP或STC2通过共价结合进行微调，但其结构和分子基

础在很大程度上仍然难以确定。

近期，北京大学第三医院妇产科杭婧/乔杰/魏瑗研究团队在国际权威

期刊CellDiscovery发表了题为“Structuralinsightsintothe

covalentregulationofPAPP-AactivitybyproMBPandSTC2”

的研究文章。该研究报道了内源性纯化的PAPP-A分别与调节剂

proMBP或STC2（斯钙素蛋白2）形成的两个复合物的冷冻电镜结构。

这两种调节剂均通过广泛的相互作用与PAPP-A结合，形成的空间位

阻阻止了底物蛋白的结合和切割。研究还指出proMBP对PAPP-A的调

控在选择性宫内生长受限（sIUGR）妊娠中具有调节胎盘功能的重要

作用。

研究结果

01：PAPP-A-proMBP复合物的低温电镜结构

为了评估PAPP-A活性和proMBP调节的分子机制，研究人员从怀孕的

人类血浆中纯化了内源性的PAPP-A-proMBP复合物，并确定了其冷冻

电镜结构。基于该结构构建了PAPP-A的多域组织示意图：一个层粘

连蛋白球状折叠结构域（LGD，Arg1-Phe230），一个包含两个LNR模

块（LNR1和LNR2，Asn332-Tyr414）的蛋白酶催化结构域（PD，

Leu243-Pro592），一个弯曲的巾状结构域（SD，Gly593-Gly915），

一个β-桶状结构（βBD，Asp916-Asp1134），一个包含五个模块的

补体控制蛋白结构（CCP，Cys1135-Cys1474），以及一个包含第三个

LNR模块的C端结构（CTD，Val1475-Gly1547）。

02：PAPP-A-STC2复合物的低温电镜结构

接下来，研究团队在悬浮的HEK293F细胞中重组过度表达PAPP-A，

利用低温电镜获得3.8Å的PAPP-A-STC2结构图。与PAPP-A-proMBP

复合物中的两个proMBP亚单位不同，STC2以同源二聚体的形式出现，

并与PAPP-A形成2：2的异源四聚体。每个STC2包含9个α-螺旋和

14个半胱氨酸，其中12个形成6对分子内二硫键，来自两个STC2

分子的Cys211残基形成一个分子间的二硫键以促进二聚体的形成。

此外，Cys120与PAPP-A的Cys652相连，并位于PAPP-A-STC2界面。

03：与PAPP-A结合的机制相似

研究发现PAPP-A是一个高度灵活的二聚体。从结构上来看proMBP和

STC2都被嵌入到PAPP-A中，结合特性是相似的。ProMBP或STC2通

过空间位阻抑制底物裂解，并与PAPP-A催化裂口远端的多个结构域

建立广泛的相互作用。proMBP或STC2通过多个界面与PAPP-A结合，

诱导的构象变化和直接的竞争将导致P