反相超高效液相色谱法测定水质中的乙酸含量 .pdfVIP

龙源期刊网

反相超高效液相色谱法测定水质中的乙酸含

量

作者：谭松林

来源：《绿色科技》2017年第20期

摘要：研究了反相超高效液相色谱法测定水质中乙酸含量的色谱条件。结果表明：在

WatersT3（50mm×3mm×1.8μm）色谱柱上，以NaH2PO4（20mM/L，pH=2.6）/H3PO4缓冲

液作为流动相，210nm处紫外检测水质中的乙酸；其流动相流速为0.2mL/min，柱温30℃，

进样量1.0μL。该方法简便快捷，样品加标回收率为68.5%～72.1%。

关键词：乙酸；反相超高效液相；紫外检测

中图分类号：X832

文献标识码：A文章编号（2017

引言1

水体中少量的乙酸不仅表现为酸性，而且使其化学需氧量增高，这对水系统的生态平衡和

人的身体健康带来严重的危害，因此快速便捷的检测水质中的乙酸含量在环境监测中显得尤为

重要。目前对乙酸的分析方法主要要有滴定法、薄层层析法、分光光度法、荧光法、气相色谱

法以及酶法等[1～4]。而这些方法或需经预分离和衍生化等前处理，或精准度不高，而且操作

繁琐。笔者采用反相超高效液相色谱法，直接进样测定水质中的乙酸含量，具有操作简单快

捷、准确度高的优点。

实验部2分

实验原理2.1

水样经0.22μm的水相滤膜或针式水相滤头过滤后直接进样，采用反相超高效液相色谱进

行检测，以保留时间定性，峰面积定量计算样品中乙酸的含量。

样品的2.2采集与保存

水样采集于1000mL棕色玻璃瓶中，1～5℃冷藏，尽快分析，分析前将样品自然升至室

温。采样瓶预先用洗涤剂洗一次，自来水洗三次，蒸馏水洗一次。

仪器及试剂2.3

龙源期刊网

WatersACQUITYUPLC超高效液相色谱仪；美国Millipore（simplicity185）超纯水机；

0.22μm滤膜针式过滤器和0.22μm水相滤膜；吉尔森移液枪（1000μL、100μL、10μL）；

868型酸度计。

配制1mg/mL的乙酸标准储备液，用时根据需要进行稀释。所用试剂均为分析纯及以上。

色谱条件2.4

流动相为NaH2PO4（20mM/L，pH值为2.6）/H3PO4缓冲液，使用前用0.22μm滤膜过

滤；色谱柱为WatersT3柱（50mm×3mm×1.8μm）；柱温30℃；流速0.2mL/min；最大吸

收波长为210nm；进样量1.0μL。待测样品进样前经0.22μm滤膜过滤。

结果与讨论3

紫外检测波长的选择3.1

乙酸的紫外吸收为羟基上n→π*电子跃迁[5]，其最大吸收峰在210nm处，所以将紫外检

测吸收波长确定在210nm。

流动相的选择3.2

WatersT3色谱柱是一种独特的超纯硅胶基质的反相C18色谱柱，乙酸要保持分子状态，

才能在柱上被分离开来。乙酸在水中的pKa为4.76，假若有1.0%的乙酸解离以离子状态存

在，根据下式计算，其流动相的pH值应该小于2.76。

pH=pKa+log（[Ac-]/[HAc]）=4.76+log（0.01）=2.76

WatersT3柱的pH值耐受范围2.0～8.0，若将流动相的pH值逼近2.0则影响色谱柱的使

用寿命；所以从延长柱子使用寿命和乙酸分离效果两方面综合考虑，最终确定流动相的pH值

为2.6。

标准3.3曲线的绘制与检出限

根据以上2.4确定的色谱条件，采用流动相缓冲液分别配制含乙酸35.0、50.0、100.0、

200.0、400.0、500.0mg/L的标准序列，乙酸的保留时间为2.67min。以乙酸标准浓度对响应

峰面积绘制标准曲线，其曲线方程为：

y=177.9213x-1924.132，r=0.9997（式中y为峰面积，x为乙酸浓度mg/L）。

其标准样品的图谱见图1。