生化天然产物化学研究方法.ppt

（六）天然药物中生物活性成分研究需要注意的几个问题:创新药物的开发是一个高技术、高风险、高投入、高回报、知识密集型的系统工程,涉及化学、药理、制剂、临床医学、毒理等多学科领域。（1个创新药物需10～12年，耗资2～3亿美元；但年销售额可达百亿美元）创新药物与活性化合物是两码事（体内药效、毒性、临床疗效、制剂、吸收、分布、代谢、排泄、原料、成本、市场）。要注重知识产权的保护（活性部位或活性单体）。第31页,共47页，星期六，2024年，5月选择适当的活性测试方法天然活性化合物的追踪分离能否取得成功，关键在于有无好的生物活性测试体系。试验模型可以有整体动物、器官、组织、细胞、酶或受体以及体内生物活性物质等。近来并已开始注意在基因调控水平上建立起新的筛选体系。第32页,共47页，星期六，2024年，5月（1）动物模型优点：采用整体动物进行的试验与人比较相近。缺点：实验费时费钱，现象复杂，而且动物个体差异以及病理模型难于建立。用动物模型作为指导分离过程的活性筛选方法不太适宜。第33页,共47页，星期六，2024年，5月（2）体外模型优点：灵敏、简便、可用于微量样品的测试。利用对酶、受体或体内生物活性物质的抑制或促进作用，以及利用基因调控影响进行的活性测试方法简便易行、可定量。缺点：有时体外活性测试方法所得结果与药物实际在体内的作用并不平行。体外活性测试方法在实际工作中得到越来越广泛的应用。第34页,共47页，星期六，2024年，5月3.确保供试材料具有活性这是追踪分离活性化合物的前提。为了确保活性成分的分离工作在可靠的基础上进行，对供试天然药物或中药有时须采用多项指标、体内外结合进行测试加以确认。第35页,共47页，星期六，2024年，5月美国国立癌症研究中心筛选抗肿瘤活性粗提取物的方法:优点：①活性低或含最少的化合物不至于丢失；②增加了检出新化合物的机会；③可能分离得到具有不同作用机制的化合物。第36页,共47页，星期六，2024年，5月4、在众多生物活性中力求找出最本质的作用天然药物或中药在临床治疗上可能作用于多个靶点，因而具有多种疗效，即表现出多方面的活性。研究者应当力求找出其中最本质的作用，选择建立反映临床治疗作用特点、且效果与之平行的活性测试体系，才有可能追踪分离出目的活性成分或甚至有效成分。第37页,共47页，星期六，2024年，5月第38页,共47页，星期六，2024年，5月5、注意正确比较并判断各个组分的活性分离过程中总是按“等剂量不等强度原则”对每一阶段得到的组分（子体）进行活性定量评估，并与母体作比较，追踪活性最强组分。第39页,共47页，星期六，2024年，5月如果与母体比较，所得几个子体活性强弱参差不齐，则示活性分离与物质分离平行，预示可能得到良好的分离效果；如果某个子体活性显著增强，则示分离过程中可能除去了某种拮抗作用物质。具有良好的物质分离与活性分离。第40页,共47页，星期六，2024年，5月如果所得各个子体活性均见明显减弱，则提示活性成分可能分解、流散、或因吸附剂发生不可逆吸附所致，或因该药物的活性原本为多组分的综合作用，故分离后反而导致活性的减弱或丧失。具体问题宜具体分析，在查明原因后立即采取相应对策处理。分离过程中应配合活性测试，采用多种分离手段以求获得良好的分离效果，并应尽量避免采用可能导致活性成分分解或不可逆吸附的方法或试剂。第41页,共47页，星期六，2024年，5月五、我国中药、天然药物化学研究存在的六个主要问题。一些研究者只是单纯进行化学研究，满足于发现一些新化合物发表文章，对活性则极不重视，很少有人进行活性成分研究。活性成分研究的思路和方法不当。化学家与生物学家相互脱节。未能重视中医药的传统经验。多采用西医哲学思想研究中药。第42页,共47页，星期六，2024年，5月从中药或天然药物中得到的活性成分，往往未做进一步的结构修饰或者结构改造，并就结构-活性相关问题进行深入探讨，对创新药物的贡献不大。研究成果也未能更好地用于指导中药制剂的标准化、规范化，对推动中药现代化起的作用不大。-----姚新生院士(ChinaPharmacy2001,12(7):415第43页,共47页，星期六，2024年，5月新药研发的关键技术1、有效成分或有效部位纯化技术色谱技术：大孔吸附树脂、离子交换、聚酰胺、反相硅胶、葡聚糖凝胶、液滴逆流、高速逆流超临界流体萃取分子蒸馏膜分离结晶2、有效部位定量分析总成分