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唾液淀粉酶的性质和活力测定
一．实验目的
一1通过唾液淀粉酶性质的测定;了解酶的专一性和多种因素对酶粗反
应的影响;pH;底物浓度;温度;激活剂;抑制剂等
2学习酶活力;酶活力单位;比活力的测定;加深对概念的理解；
3学会用考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量;学会用3;5-二硝基水杨酸
测定还原糖的含量;熟练操作分光光度计..
二．实验试剂和器材
器材：可见光分光光度计;试管;移液管;恒温水浴锅;pH试纸;1000ml
容量瓶和100ml的容量瓶各一只；
药品：可溶性淀粉;考马斯亮蓝试剂G-250;3;5-二硝基水杨
酸;NaoH;HCL;标准牛血清白蛋白溶液;醋酸;醋酸钠;蒸馏水;95%乙醇;85%
磷;；0.15molNaCL/ml;0.15mol/L硫酸铜溶液;碘化钾–碘溶液：将碘化钾
20克和碘10克溶解在100ml水中;使用前稀释10倍..
注：1考马斯亮蓝G-250试剂：考马斯亮蓝试剂G-250100mg溶于95%
乙醇中;加入100ml85%磷酸;加水稀释至1000ml;过滤即可..
2标准牛血清白蛋白溶液：结晶牛血清白蛋白用凯式定氮法测蛋白含
量;根据其纯度用0.15mol/LNacl配置成0.1mg/L的蛋白液；
3配置0.01%g/ml;0.1%g/ml;;0.5%g/ml;1%g/ml;2%g/ml;3%g/ml的的
溶性淀粉溶液;
4配置一系列pH2的缓冲溶液
0.2Mol/L磷酸氢二钠溶液为28.40g/L;Mr=141.98;称取2.84g溶于
100ml的水中
0.1Mol/L柠檬酸溶液21.01g/l;Mr=210.14;称取2.1溶于100ml水中；
锥形瓶0.2Mol/L磷酸氢二0.1Mol/L柠檬缓冲液
号钠毫升酸毫升pH
10.419.602.2
24.1115.893.0
37.7112.294.0
410.309.705.0
511.158.855.4
612.097.915.8
713.226.786.2
814.555.456.6
916.473.537.0
1018.171.837.4
1119.150.857.8
1219.450.558.0
5配置0.15mol/L的NaCL溶液和0.15mol/L硫酸铜溶液
三．实验步骤
一
1pH的对酶的影响
1）葡萄糖标准曲线的制定
准确称取100mgAR纯
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