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第3章基因工程
第2节基因工程的基本操作程序
[基础检查]
1.(2021·普宁)下列关于基因工程的叙述中,正确的是()
①基因工程打破了物种与物种之间的界限②基因治疗是基因工程技术的
应用③载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞④所需要的工
具酶有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和运载体⑤常使用的运载体有大
肠杆菌、质粒和动植物病毒等
A.②③⑤B.①②③
C.①②⑤D.①③④
解析:基因工程的优点是能定向地改变生物的性状,突破了物种之间的生理
隔离界限,可用于基因治疗;载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细
胞;运载体不是工具酶;常使用的运载体是质粒、噬菌体和动植物病毒等,大
肠杆菌不能作为运载体。
答案:B
2.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是()
①从基因文库中获取目的基因②利用PCR扩增目的基因③逆转录④
通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
A.①②B.②③
C.③④D.①③
解析:PCR的原理是DNA半保留复制,即将双链DNA之间的氢键打开,变成单
链DNA,作为反应的模板,②需要;逆转录则是以目的基因转录出的mRNA为
模板,在逆转录酶的作用下,先形成互补的单链DNA,再合成双链DNA,③需
要;①④则均不需要模板。
答案:B
3.(2021·东莞)PCR是一项体外扩增DNA的技术,需在反应溶液中添加模板、
原料、酶等物质,通过加热(90℃以上)使模板DNA解旋,冷却后在一定温度
(72℃左右)下利用DNA聚合酶合成子代脱氧核苷酸链,如此循环往复,可使
特定DNA片段以指数形式扩增。与体内DNA复制相比,有关PCR技术叙述
错误的是()
A.以DNA分子的一条链作为模板
B.添加的DNA聚合酶热稳定性较高
C.反应溶液中无须额外添加解旋酶
D.新合成的DNA分子会作为复制模板
解析:PCR的原理是DNA复制,以DNA分子的两条链分别作为模板。
答案:A
4.(2021·佛山)实时荧光RT-PCR技术可快速检测新型冠状病毒的核酸,为疫
情防控提供了有力保障。检测原理如下图所示,探针是含荧光基团并有特
定序列的DNA单链。下列说法错误的是()
病毒RNA单链DNA杂交DNADNA(发出荧光)
A.逆转录和杂交DNA扩增所需的原料相同
B.逆转录、扩增和分子杂交中碱基配对情况相同
C.病毒RNA的遗传信息通过逆转录传递给单链DNA
D.逆转录和杂交DNA扩增所需酶种类不同
解析:逆转录和杂交DNA扩增的产物都是DNA,故所需的原料都是脱氧核苷
酸;逆转录碱基配对原则是U—A、A—T、C—G、G—C,扩增和分子杂交中
碱基配对原则是T—A、A—T、C—G、G—C;病毒RNA的遗传信息传递给
单链DNA,该过程叫逆转录;逆转录需要逆转录酶,杂交DNA扩增所需酶是
DNA聚合酶。
答案:B
5.将目的基因导入大肠杆菌细胞和小鼠受精卵,常用的方法分别是()
A.显微注射,农杆菌转化法
B.农杆菌转化法,花粉管通道法
C.Ca2+转化法,显微注射
D.基因枪法,显微注射
解析:大肠杆菌作为受体细胞,一般用Ca2+处理,使其处于一种能吸收周围环
境中DNA分子的生理状态;对于动物细胞来说,常用的方法是显微注射。
答案:C
6.下图为基因工程的部分过程示意图,甲~丁代表各不同阶段参与的成分。
下列叙述正确
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