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生物技术概论
一、名词解释
基因工程:(geneticengineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术。所谓
基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重
组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。
DNA变性:指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从而使核酸的天然
构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭
到破坏,但不涉及到其一级结构的改变。凡能破坏双螺旋稳定性的因素,如加热、
极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等,均可引起核酸分子变性。
DNA克隆:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质——同源或异源、原
核或真核、天然或人工的DNA与载体DNA相结合成一具有自我复制能力的DNA
分子——复制子,继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子
细胞,再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子,即DNA克
隆。
质粒:存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很
小的环状DNA分子。
转座子:是基因组中一段特异的具有转位特性的独立的DNA序列。它们是细菌染
色体或质粒DNA的正常组成部分,转座子可以通过切割、重新整合等一系列过程
从基因组的一个位置“跳跃”到另一个位置,即一段DNA顺序可以从原位上单独
复制或断裂下来,环化后插入另一位点,并对其后的基因起调控作用,此过程称
转座。
位点特异性重组:重组发生在同源的短序列的范围之内,重组时发生精确的切割、
连接反应,DNA不失去、不合成。两个DNA分子并不进行对等的交换,有时是一
个DNA分子整合到另一个DNA分子上(插入重组)。是遗传重组的一类。这类重
组依赖于小范围同源序列的联会,重组也只发生在同源的短序列的范围之内,需
要位点特异性的蛋白质分子参与催化。
回文结构:双链DNA中的一段倒置重复序列,当该序列的双链被打开后,可形成局
部“十”字形结构,这段序列被称为回文序列。
载体:是指将外源DNA片段运送进宿主细胞进行扩增或表达的运载工具。
克隆载体:都含有一个松弛型复制子,能带动外源基因在宿主细胞中复制扩增,
它是用来克隆和扩增DNA片段的载体。
表达载体:具有克隆载体的基本原件,还具有转录、翻译所必需的DNA顺序的载
体。
穿梭载体:指在两种宿主生物体内复制的载体分子,因而可以运载目的基因穿梭
往返两种生物之间。穿梭质粒含有原核和真核生物2个复制子,以确保两类细胞
中扩增。
同源重组:是指发生在非姐妹染色单体之间或同一染色体上含有同源序列的DNA
分子之间或分子之内的重新组合。在基因工程中主要用于将外源基因定位导入受
体细胞染色体上的方法,因为在该座位有与导入基因同源的序列,通过单一或双
交换,新基因片段可替换有缺陷的基因片段,达到修正缺陷基因的目的。
胚胎移植:又称受精卵移植是指对一头(只)雌性动物(供体)进行超数排卵处理,
在其发情配种后一定时间内从其生殖道取出早期胚胎,然后把这些胚胎用移植到
另外一头(只)与供体同期发情的未经配种的受体雌性动物生殖道的相应部位,
让其在受体子宫着床并继续生长发育,最后产下供体的后代,,即俗称的“借腹怀
胎”。
启动子:可与RNA聚合酶特异性结合而使转录开始的一段DNA序列。但启动子本
身并不被转录,属于基因上游对转录起调控作用的5′端非编码区。
增强子:为真核基因组中的一种具有增强临近基因转录过程的调控顺序。起作用
与增强子所在的位置与方向无关。负增强子及负调控子。
超数排卵:在母畜的发情周期中,即在排卵前4~5天给予一定量的促性腺激素,
使快要闭缩的卵泡发育并排卵,以达到超数排卵目的的技术。基因敲除:是指通过DNA同源重组定向将外源基因插入宿主细
胞染色体DNA,从
而使特定基因在细胞内或生物体内失活的过程。
传代培养:当原代培养的细胞长满培养空间,就需要将培养物分割成小的部分,
重新接种到另外的培养器皿内,再进行培养,这个过程就称为传代(passage)培
养。
细胞杂交:(cellhybridization)特指用人工方法把不同类型的两个或两个以上
细胞合并成一个细胞的技术。
同期发情:诱导母畜按照预定时间发情的这一过程称为同期发情
(synchronizationofestrus)。
细胞冷冻保存:就是对细胞采取特殊的保护措施和降温程序,使细胞在超低温(-
79℃或-196℃)的条件下代谢停止,升温后又不失去代谢恢复的能力,从而
长期保存细胞。
胰腺干细胞:是一类存在于胎儿和成年胰腺组织中的成体干细胞,能自我更新,
具有多分化潜能,其特点是在自然分化过程中首先分化为胰腺组织的各种细胞。
多能干细胞:具有分化出多种组织细胞的潜能,但却失去了发育成完
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