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专题2细胞工程

2.1植物细胞工程细胞工程应用的原理和方法研究的水平研究的目的细胞生物学和分子生物学细胞整体水平或细胞器水平按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品概念分类植物细胞工程动物细胞工程植物细胞工程常用的技术植物细胞工程的理论基础是：植物细胞的全能性植物细胞工程常用的技术是植物组织培养植物体细胞杂交概念：细胞的全能性是指生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质及发育为完整个体所必需的全部基因。全能性高低：①受精卵＞胚胎干细胞＞生殖细胞＞体细胞②植物细胞＞动物细胞植物组织培养植物组织培养的条件离体细胞、组织或器官适宜的外界环境条件，例如无菌、适宜的温度、湿度、光照等培养基（一定的营养物质，激素）概念植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。植物组织培养的培养基无机营养成分：无机盐离子有机营养成分：含N物质：包括维生素和氨基酸碳源：2%—5%的蔗糖溶液，调节渗透压琼脂：起支持作用激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素PH值：5.0－6.0植物组织培养的过程离体的植物器官、组织或细胞脱分化（又叫去分化）愈伤组织（排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞）再分化根或芽等器官植物体01将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成新的植物体的过程。1、定义：02克服了远缘杂交不亲和的障碍，拓展了可用于杂交的亲本组合范围。。2、优势：（与有性杂交方法比较）植物体细胞杂交植物A细胞植物B细胞去壁原生质体A原生质体B原生质体融合融合体再生壁杂种细胞细胞分裂愈伤组织杂种植株去壁的常用方法：酶解法（纤维素酶、果胶酶等）原生质体融合方法：物理法：离心、振动、电刺激等化学法：聚乙二醇（PEG）植物体细胞杂交过程示意图繁殖植物的新途径微型育种作物脱毒人工种子1育种新方法单倍体育种诱导突变体2细胞产物的工厂化生产3植物细胞工程的实际应用微型繁殖概念：应用组织培养技术，快速繁殖植物（也叫快速繁殖技术）原理：植物细胞的全能性优点：繁殖率高，可大批量生产取材少培养周期短保持优良性状作物脱毒病毒在作物体内逐年积累，会导致作物产量降低，品质变差分生区附近（茎尖、根尖）的病毒极少，甚至没有采用茎尖进行组织培养人工种子人工薄膜+胚状体（不定芽、顶芽、腋芽）结构：细胞全能性原理：不受气候、季节、地域的限制保留优良性状时间短，占地少优点：组织培养技术：壹贰叁肆方法：花药离体培养技术：组织培养获得单倍体秋水素处理单倍体的幼苗，使染色体加倍优点：明显缩短了育种年限后代稳定遗传单倍体育种突变体的利用利用组织培养时，分裂状态的细胞易受培养条件和外界压力（如射线，化学物质等）的影响而产生突变的原理，诱导并筛选出对人类有用的突变体。细胞产物的工厂化生产红豆杉与紫杉醇人参皂甘的生产动物细胞工程2动物细胞培养单克隆抗体技术核移植动物细胞工程常用技术动物细胞融合1.动物细胞培养的概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.2、动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）3.动物细胞培养的条件：①无菌、无毒的环境培养液和所有培养用具进行无菌处理措施：培养液中加抗生素，定期更换培养液②营养糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子（维生素、激素等）和动物血清③温度和PH④气体环境O2CO295％空气5％的CO2动物细胞培养技术的应用:01蛋白质生物制品的生产如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体02健康细胞培养培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植03细胞的生理、药理、病理研究04植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖植物激素葡萄