2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体

植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养温故而知新③意义：打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育新的作物类型。①植物细胞融合完成的标志：杂种细胞再生出新的细胞壁。②植物体细胞杂交技术完成的标志：形成杂种植株。

有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢？动物细胞融合技术

一、动物细胞融合技术1、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2、原理：细胞膜的流动性3、结果：形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息的杂交细胞。4、融合方法：动物细胞没有细胞壁，可以直接诱导融合与植物原生质体融合的方法相同物理法:电融合法、离心法化学法:聚乙二醇(PEG)融合法生物法:灭活病毒诱导法（动物细胞融合特有）5、意义：6、应用：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体。

一、动物细胞融合技术灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。P49动物细胞融合实质及完成的标志：细胞核融合原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。

一、动物细胞融合技术思考：诱导融合后的细胞一定具有双方的遗传信息吗？为什么？不一定，诱导A、B两种细胞融合，融合后可能有A、B未融合细胞，还有AA、AB、BB等多种细胞，因此细胞融合后需要进行筛选。

植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能

(1)与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒()(2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构()(3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞()×√判断下列正误×

这个场景大家再熟悉不过了出外做核酸太麻烦，在家如何确定自己是否“阳”了？

二、单克隆抗体的制备单克隆抗体

二、单克隆抗体的制备血清（抗体主要分布部位）传统抗体制备方法:向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。产量低、纯度低，特异性差血清含量有限(一)传统抗体制作方法及缺陷：

二、单克隆抗体的制备抗体1抗体2抗体3抗体4…….动物体内产生的特异性抗体的种类超过百万种抗原1抗原2抗原3抗原4B细胞1B细胞2B细胞3B细胞4…….每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体刺激刺激刺激刺激(一)传统抗体制作方法及缺陷：需要得到纯度低特异性差

二、单克隆抗体的制备（1）动物体内产生的特异性抗体种类多达百万种；（2）每个B淋巴细胞（浆细胞）只分泌一种特异性的抗体。科学家发现：遗憾：如何解决这一难题？如何获得大量、单一的抗体？每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体单一B淋巴细胞细胞群选择克隆产生大量纯度高特异性强的抗体B淋巴细胞不可能无限增殖

二、单克隆抗体的制备一个极富创造力的方案：动物细胞融合杂交细胞动物细胞培养单克隆抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体杂交瘤细胞既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体1975年，米尔斯坦和柯勒1984年，诺贝尔生理学或医学奖

二、单克隆抗体的制备单克隆抗体：由单一B淋巴细胞克隆（增殖）的细胞群产生的特异性抗体。思考与讨论单克隆抗体分析概念中“单”和“克隆”的含义。总结单克隆抗体的概念？

二、单克隆抗体的制备1、制备单克隆抗体的原理（1）每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,在体外培养条件下,不能无限增殖。（2）骨髓瘤细胞能无限增殖，不能产生抗体。（3）通过动物细胞融合技术将两种细胞融合，得到的融合细胞既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体。骨髓瘤细胞能无限增殖能产生抗体B淋巴细胞

B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交细胞融合自主阅读P48-49图2-16，合作探究阶段一：动物细胞融合阶段二：分离出产生所需抗体的杂交细胞阶段三：得到大量单克隆抗体①该过程中给小鼠注射抗原的目的？②诱导融合后的细胞类型？若仅考虑两两细胞融合呢？④哪