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乐民之乐者，民亦乐其乐；忧民之忧者，民亦忧其忧。——《孟子》

细菌内毒素检查操作规程

1.目的：建立一个测定细菌内毒素的检查方法。

2.范围：适用于需测定细菌内毒素的药品等。

3.责任：质检科检验员对实施本规程负责。

4.程序

4.1原理

4.1.1本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品

中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。

4.1.2细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色

基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除

另有规定外，以凝胶法结果为准。

4.1.3EU

细菌内毒素的量用内毒素单位（）表示。

4.1.4细菌内毒素国家标准品系自大肠杆菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试

剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。

4.1.5细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于试验

中的鲎试剂灵敏度复核、干扰试验及各种阳性对照。

4.1.6凝胶法细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.015EU/ml的灭菌注射用

水。光度测定法的细菌内毒素检查用水，其内毒素的含量应小于0.005EU/ml。

4.1.7试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。常用的方法是在

250℃干烤至少60分钟，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。若使

用塑料器械，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试

验无干扰的器械。试验操作过程应防止微生物的污染。

4.2供试品溶液的制备某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶

液。一般要求供试品溶液的pH值在6.0～8.0的范围内。对于过酸、过碱或本身有

缓冲能力的供试品，需调节被测溶液（或其稀释液）的pH值，可使用酸、碱溶液或鲎

试剂生产厂家推荐的适宜的缓冲液调节pH值。酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在

已去除内毒素的容器中配制。缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。

4.3内毒素限值的确定

乐民之乐者，民亦乐其乐；忧民之忧者，民亦忧其忧。——《孟子》

4.3.1药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公式确定：

L=K/M

LEU/mlEU/mgEU/U

式中：——供试品的细菌内毒素限值，以、或（活性单位）表

示；

KEU/kgh

——人每公斤体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以（·）表示，注

K5EU/kghK2.5EU/kghK

射剂＝（·），放射性药品注射剂＝（·），鞘内用注射剂

0.2EU/kgh

＝（·）。

Mml/kghmg/

——人用每公斤体重每小时的最大供试品剂量，以（·）、

kghU/kgh6