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生物检材中苯丙胺类兴奋剂、哌替啶和氯胺酮的测定

1范围

本技术规范规定了血液、尿液及毛发中苯丙胺（AMP）、甲基苯丙胺（MAMP）、3、4-亚甲双氧甲基苯丙胺（MDMA）、4、5-亚甲双氧苯丙胺（MDA）、哌替啶和氯胺酮的测定方法。

本技术规范适用于血液、尿液及毛发中AMP、MAMP、MDMA、MDA、哌替啶和氯胺酮的定性定量分析。

2规范性引用文件

下列文件对于本技术规范的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本技术规范。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本技术规范。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

第一篇免疫筛选法

3原理

采用高度特异性的抗原-抗体反应的免疫胶体金层析技术，通过单克隆抗体竞争结合苯丙胺或甲基苯丙胺偶联物和尿液中可能含有的苯丙胺或甲基苯丙胺，试剂盒含有被事先固定于膜上测试区（T）的苯丙胺或甲基苯丙胺偶联物和被胶体金标记的抗苯丙胺或甲基苯丙胺单克隆抗体。

4试剂

苯丙胺尿液胶体金法试剂盒，甲基苯丙胺尿液胶体金法试剂盒。

5操作方法

用吸管吸取尿液检材，滴入试剂盒的样品孔中5滴（约150～200μL），3～5分钟后观察结果。

6结果判定

6.1苯丙胺尿液胶体金法试剂盒

6.1.1阳性

仅质控区C出现紫红色带，而测试区T无紫红色带，提示含有苯丙胺成分。

6.1.2阴性

质控区C及测试区T均出现紫红色带，表明尿液中无苯丙胺或苯丙胺浓度在1000ng/mL以下。

6.1.3无效

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质控区C未出现紫红色带，结果无效，应重新检验。

6.2甲基苯丙胺尿液胶体金法试剂盒

6.2.1阳性

仅质控区C出现紫红色带，而测试区T无紫红色带，表明甲基苯丙胺浓度在1000ng/mL以上。

6.2.2阴性

质控区C及测试区T均出现紫红色带，表明尿液中无甲基苯丙胺或甲基苯丙胺浓度在1000ng/mL以下。

6.2.3无效

质控区C未出现紫红色带，结果无效，应重新检验。

第二篇气相色谱-质谱联用法

7原理

利用苯丙胺类兴奋剂、哌替啶和氯胺酮易溶于有机溶剂、难溶于水的特点，在碱性条件下用有机溶剂从生物检材中提出，用气相色谱-质谱联用仪进行检测，经与平行操作的苯丙胺类兴奋剂或哌替啶、氯胺酮对照品比较，以保留时间和特征碎片离子定性分析；以定量离子峰面积为依据，外标法定量。

8试剂和材料

除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

8.1AMP、MAMP、MDMA、MDA、哌替啶和氯胺酮

纯度≥98%。

8.2AMP、MAMP、MDMA、MDA、哌替啶、氯胺酮对照品溶液的制备

分别精密称取对照品AMP、MAMP、MDMA、MDA、哌替啶、氯胺酮各适量，用甲醇配成1mg/mL的对照品储备溶液，置于冰箱中冷冻保存，有效期为12个月。试验中所用其它浓度的标准溶液均从上述储备液稀释而得，冰箱中冷藏保存，有效期为6个月。

8.310%氢氧化钠溶液

8.4乙醚

8.5甲醇

8.6丙酮

8.70.1%十二烷基磺酸钠溶液

8.80.1%洗洁精溶液

8.90.1mol/L盐酸溶液

9仪器

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9.1气相色谱-质谱联用仪

配有电子轰击源（EI）。

9.2分析天平

感量0.1mg。

9.3微波炉

9.4涡旋混合器

9.5离心机

9.6恒温水浴锅

9.7空气泵

9.8移液器

9.9具塞离心试管

9.10冷冻研磨机

10测定步骤

10.1样品预处理

10.1.1尿液直接提取

取尿液2mL置于10mL具塞离心管中，用10%氢氧化钠溶液调至pH11，用乙醚3mL提取，涡旋混合、离心，转移有机层至另一离心管中，约60。C水浴中挥干，残留物用50μL甲醇溶解，取1μL进气相色谱/质谱联用仪分析。

10.1.2血液直接提取

取血液2mL置于10mL具塞离心管中，加入10%氢氧化钠溶液0.2mL，用乙醚3mL提取，以下同10.1.1项下操作。

10.1.3毛发提取

10.1.3.1毛发采集

贴发根处剪取毛发，发根处作标记。量取长度。

10.1.3.2毛发洗涤

毛发样品依次用0.1%十二烷基磺酸钠溶液、0.1%洗洁精溶液、水和丙酮振荡洗涤，晾干后剪成约1mm段，供检。

10.1.3.3毛发的水解

10.1.3.3.1毛发的酸水解

称取50mg毛发，