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汇报人：文小库2024-12-14病理组织切片制作

目录CONTENTS病理组织切片制作概述病理组织取材与固定组织脱水、透明与浸蜡切片机制片技术染色方法与原理封片、保存与质控病理组织切片制作常见问题解答

01病理组织切片制作概述

定义病理组织切片是一种将病变组织制成薄片，用显微镜进行检查的技术。目的用于观察病变组织的形态结构和病理变化，为疾病的诊断和治疗提供依据。定义与目的

取材从病变组织中选取具有代表性的部分，并将其切成适当大小的组织块。固定使用化学或物理方法将组织块固定，以保持其形态和结构。脱水将组织块中的水分逐渐脱去，以便后续的包埋和切片。包埋将脱水后的组织块包埋在石蜡中，使其变硬便于切片。切片使用切片机将包埋好的组织块切成薄片，通常厚度为3-5微米。染色使用苏木精-伊红等染料对切片进行染色，使细胞和组织结构更清晰可见。切片制作流程简介010203040506

切片质量评估标准切片厚度应控制在适宜范围内，过厚或过薄均会影响观察效果。切片完整性切片应完整无缺损，包含所有需要观察的组织结构。染色效果染色应清晰、鲜艳，使细胞和组织结构易于辨认。无污染切片制作过程中应避免任何形式的污染，如水分、化学试剂等。

02病理组织取材与固定

病变部位选择选择病变明显、具有代表性的部位进行取材，确保病理切片的诊断价值。样本大小适宜取材时应考虑样本大小，既要包含足够的组织细胞，又要避免过大导致固定和染色效果不佳。避免挤压和损伤在取材过程中，避免对组织造成挤压和损伤，以免影响组织形态和诊断准确性。取材原则与技巧

甲醛能与组织中的蛋白质发生交联反应，使组织细胞凝固，保持形态和结构的完整性，是最常用的固定液之一。甲醛固定液乙醇能迅速穿透组织，使组织细胞内的蛋白质迅速凝固，常用于快速固定和染色。乙醇固定液丙酮具有快速脱水作用，能使组织细胞迅速固定，但渗透性较强，易破坏组织细胞结构。丙酮固定液固定液选择及作用机制

固定时间固定时间应根据组织类型、大小和固定液种类等因素而定，一般应控制在1-24小时内，过长或过短都会影响固定效果。固定温度固定温度通常控制在室温或稍微高于室温的范围内，避免过高或过低影响固定效果。固定时间与温度控制

03组织脱水、透明与浸蜡

脱水剂种类及使用方法乙醇常用脱水剂，可以逐步将组织内的水分脱去，但需要注意脱水时间和浓度。脱水速度快，但易使组织块收缩，常用于快速脱水。丙酮可以兼顾脱水速度和组织块收缩程度，是常用的脱水方法之一。乙醇与丙酮混合液

透明剂作用使脱水后的组织变得透明，便于浸蜡和切片。透明剂选择常用的透明剂为二甲苯，其透明效果强，但有毒性，需注意防护措施。操作要点透明剂需充分浸没组织块，并轻轻摇动，以便透明剂渗透到组织内部。透明剂作用及操作要点

浸蜡温度浸蜡温度过高，会使组织块变硬变脆，影响切片质量；温度过低，则浸蜡速度过慢，影响制片效率。浸蜡时间浸蜡时间应根据组织块大小和浸蜡温度来调整，确保组织块充分浸透石蜡。浸蜡次数一般需要浸蜡2-3次，以确保组织块充分浸透石蜡。浸蜡温度与时间掌握

04切片机制片技术

旋转式切片机适用于组织块较小、较软的病理标本，切片速度快，但厚度均匀性较差。滑走式切片机冰冻切片机适用于需要快速制作切片的病理标本，如手术中的快速病理诊断，但切片质量较石蜡切片差。适用于组织块较大、硬度适中的病理标本，切片厚度均匀，但操作相对复杂。切片机类型及特点比较

根据组织块硬度和切片厚度选择不同型号的刀片，以保证切片质量。刀片选择刀片安装刀片保养需将刀片固定在切片机上，确保切片时刀片稳定，不晃动。定期更换刀片，避免使用过于钝化的刀片，以保证切片效果。刀片选择与安装方法

通过调节切片机的厚度调节器，可控制切片的厚度，以满足不同的观察需求。调节切片厚度在切片过程中，需保持切片机的稳定性，以保证切片的均匀性。均匀切片切片厚度会影响染色效果，需根据染色方法选择适当的切片厚度。切片厚度与染色关系切片厚度调节技巧

05染色方法与原理

包括H-E染色、PAS染色、Masson染色等，每种染色方法有其特定的适用范围和染色效果。常规染色如免疫组化染色、原位杂交等，用于检测特定分子或基因的表达情况。特殊染色根据病变组织特点和诊断需求选择合适的染色方法。染色方法选择常用染色方法介绍

01苏木精染色细胞核内的染色质和胞质内的核糖体对碱性染料有亲和力，因此细胞核被染成蓝紫色。苏木精-伊红（H-E）染色原理02伊红染色细胞质和细胞外基质中的成分对酸性染料有亲和力，因此被染成红色或粉红色。03H-E染色效果细胞核与细胞质形成鲜明对比，便于观察细胞形态和结构。

染色结果观察与评估染色效果评估根据染色清晰度、色彩鲜艳度、对比度等指标评估染色效果。观察细胞的形态、大小、核形等特征，有助于判断细胞的良恶性。细胞形态观察观察组织的整体结构、细胞间关系等，对