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14-
第19讲酶的应用和植物的组织培育
考点
考试内容
考试要求
酶的应用
1.果汁中的果胶和果胶酶
试验与探究实力
2.α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
植物的组织培育
植物的组织培育
试验与探究实力
酶的应用
1.果汁中的果胶和果胶酶
(1)果胶:果胶是植物细胞壁的主要成分,由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成。鉴别果胶的简易方法是用乙醇溶解出现浑浊现象。
(2)果胶酶
①来源:黑曲霉、苹果青霉。
②组成:果胶酶并不是特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,主要包括果胶酶和果胶甲酯酶。
③作用:将果胶分解成可溶性的分子,使出汁率提高,也使浑浊的果汁变得澄清。
2.α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
(1)固定化酶
①形成:将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上。使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
②特性:稳定性好,与底物和产物简单分别,易于限制,能反复多次运用;便于运输和贮存,有利于自动化生产。
(2)α-淀粉酶水解作用的检测:将α-淀粉酶固定在石英砂上。肯定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精。用淀粉指示剂溶液测试,流出物呈红色,表明水解产物糊精生成。
(3)α-淀粉酶固定化试验过程
固定化α-淀粉酶,装入注射器中
↓
以0.3mL/min的流速滴加淀粉溶液过柱
↓
流出5mL淀粉溶液后接收0.5mL流出液
↓
滴加KI-I2溶液,视察颜色,稀释1倍后再视察颜色
↓
用10倍柱体积的蒸馏水洗涤固定化柱,
放置在4℃冰箱中,几天后重复试验
某同学进行苹果汁制作试验,工艺如图所示。请回答:
(1)图中用高锰酸钾溶液浸泡苹果的目的是______。黑曲霉提取液中含有的____________可水解果胶,从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过__________方式将酶固定化,酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________________________________________________________________________。
(2)试验中,操作流程A和B的先后次序为______。在苹果汁澄清过程中,应关闭的流速调整阀是______。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶,可取肯定量的果汁与等量的______混合,假如出现______现象,说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解,应将流速调______。
(3)试验后,将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天,该固定化柱仍可用于苹果汁制作试验,说明固定化酶可被________运用。
[解析](1)KMnO4具有消毒作用,可用于清洗苹果和葡萄等,将吸附在这些水果表面的微生物清洗掉;从黑曲霉和苹果青霉中可以提取得到果胶酶;石英砂可以通过吸附的方式将酶固定化。通过吸附法固定酶后,总有少量酶没有被固定住,所以要用蒸馏水洗涤固定化柱,以洗去没有固定的酶,以免影响试验效果。(2)试验过程中要先获得果胶酶,把果胶酶通过吸附法固定在石英砂上,再将石英砂装柱,然后向固定化柱中加苹果汁。果胶酶装柱后,就应关闭阀1。依据果胶不溶于乙醇的特点,可以鉴定是否有果胶的存在。流速减慢后,果胶酶可以更充分地催化分解果胶。(3)试验结束后可以用肯定量的蒸馏水洗涤固定化柱,低温环境中保存固定化柱,几天后仍可重复利用。
[答案](1)消毒果胶酶吸附未被固定的酶等
(2)A、B阀1乙醇浑浊(沉淀)慢(3)重复
eq\a\vs4\al()
干脆运用酶和固定化酶的区分
类型
干脆运用酶
固定化酶
优点
催化效率高,低耗能、低污染等
①酶既能与反应物接触,又能与产物分别;
②固定在载体上的酶还可以被重复利用
不足
①对环境条件较敏感,易失活;
②溶液中的酶很难回收重复利用,提高了生产成本;
③反应后酶会混在产物中,因此可能影响产品品质
一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,许多产物的形成是通过一系列的酶促反应得到的
[题组突破]
1.某校学生尝试用琼脂作载体,用包埋法固定α-淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。试验结果见下表(假设加入试管中的固定化淀粉酶量与一般α-淀粉酶量相同)。试验表明1号试管中淀粉未被水解,最可能的缘由是()
1号试管
2号试管
固定化淀粉酶
√
-
一般α-淀粉酶
-
√
淀粉溶液
√
√
60℃保温5min,取出冷却至室温,滴加碘—碘化钾溶液
现象
变蓝
不变蓝
A.试验中的温度过高,导致固定化淀粉酶失去活性
B.淀粉是大分子物质,难以通过琼脂与淀粉酶接触
C.水浴保温时间过短,固定化淀粉酶未将淀粉水解
D.试验程序出现错误,试管中应先加入碘—碘化钾溶液后保温
解析:选B。由于固定化酶是用包埋法固定的,而淀粉是大分子物质,它不能通过琼脂与酶充分接触,导致淀粉
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