DB12T 521-2014 牛结核病噬菌体检测技术规范.pdfVIP

ICS11.220

B41DB12

天津市地方标准

DB12/T521—2014

牛结核病噬菌体检测技术规范

Thetechnicalstandardfordetectionofbovinetuberculosisby

Mycobacteriophage

2014-04-22发布2014-07-20实施

天津市质量技术监督局发布

DB12/T521—2014

前言

本标准的编写符合GB/T1.1-2009的要求。

本标准由天津市畜牧兽医局提出。

本标准由天津市动物卫生监督所起草。

本标准主要起草人：刘子芝、赵勇、李志荣、刘纪艳、尹望中、杨建华、周永燚、王颖、赵晶。

20144

本标准于年月发布。

I

DB12/T521—2014

牛结核病噬菌体检测技术规范

1范围

本标准规定了噬菌体生物扩增技术检测牛结核病的定义、设备和仪器、培养基和试剂、检测、结果

判定、注意事项。

本标准适用于牛结核病的疫病普查、监测和诊断。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T541动物疫病实验室检验采样方法

3定义

3.1

噬菌体Bacteriophage,简称phage

噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，

故称为噬菌体。

3.2

噬菌斑plaque

在人工培养基上，细菌在噬菌体的作用下裂解形成的圆形斑，称为噬菌斑。

4设备和仪器

a生物安全柜

b离心机（4000r/min）

c振荡器

d55

水浴锅（℃)

e恒温培养箱

f有盖离心管（50mL）

g无菌试管（10mL）

h移液管（10mL）

i三角瓶（100mL，500mL）

j平皿（90mm）

k100μL1000μL

移液器及配套吸头（，）

5培养基和试剂

培养基和试剂配制方法见附录A

6检测

6.1样本的采集

1

DB12/T521—2014

按照NY/T541进行样本采集。

6.2样本的处理

6.2.1牛乳

取牛乳5mL于50mL有盖离心管中，加10mL的3%NaoH溶液；振荡混匀，室温孵育15min；

30mL4000r/min15min30mL4000

加灭菌完全培养基至，离心，弃去上清液；再加灭菌完全培养基至，

r/min离心15min后弃去上清液；加1mL灭菌完全培养基重悬沉淀物，无菌条件下转移至10mL无菌

试管中。