培养基及其制备.pptVIP

提供菌体结构物质，能源（少），含氮代谢产物，补充碳源。氮源物质是培养基的主要成分之一。母粉、麦麸、鱼粉、玉米浆、蛋白胨、尿素等。成分复杂，除含蛋白质、多肽、氨基酸外，还含糖、脂、无机盐、维生素及其他生长因子，对菌体生长非常有利。有机氮源：豆饼粉、花生饼粉、棉子饼粉、酵被吸收、利用快，但成分单一，常作辅助氮源。无机氮源：氨水、铵盐、硝酸盐贰壹叁三、氮源物质品种、产地、加工方法对有机氮源质量的影响棉籽粉：低温提取油脂后加工品（pharmamedia）、高温（proflo）黄豆粉：全脂黄豆粉（含油脂18%）、低脂黄豆粉（9%以下）、脱脂黄豆粉（2%以下）玉米浆：玉米淀粉副产物，干玉米浆、液态玉米浆、（国际知名品牌solulysL）三、氮源物质三、氮源物质质量不稳定，引起发酵水平波动无机氮源：铵盐、硝酸盐01NaNO3+4H2NH3+H2O+NaOH03注意溶液PH变化。05(NH4)SO42NH3+H2SO402代谢后产生酸性物质的营养成分叫生理酸性物质，反之叫生理碱性物质。04三、氮源物质01成为菌体的组分或菌体内酶的调节剂、维持培养基一定的离子强度。02对微生物的作用呈浓度相关无机盐四、无机盐和微量元素菌体、核酸组成成分01AMP，ADP，以及ATP合成02酶或中间代谢产物的修饰剂03某些酶的调节剂04有利于糖代谢，菌体生长，但不利于代谢产物合成05无机磷：一般不必加入。在有些品种的发酵中有害，如青霉素、四环素、麦迪霉素、柠檬酸、啤酒等。为细胞色素、细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的组成成分。铁离子STEP5STEP4STEP3STEP2STEP1钙离子作为微生物体内酶的激活剂，碳酸钙还可以作为控制发酵液pH的缓冲剂。镁离子作为微生物体内酶的激活剂。硫为蛋白质的组成成分，有时为某些代谢产物的组成成分。钠、钾离子调节渗透压和微生物细胞的通透性，调节某些酶的催化活性。锌、钴、锰、铜、硼等1作为酶的辅基或调节剂2一般而言不必另外加入3微量元素023)无机盐及微量元素使用注意点A.对于其它渠道有可能带入的过多的某种无机离子和微量元素在发酵过程中必须加以考虑。例：铁离子青霉素发酵中，铁离子的浓度要小于20μg/ml发酵罐必须进行表面处理。B、使用时注意盐的形式（pH的变化）01从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。在复合培养基中一般不须加入在合成培养基中需要补充在某些特定的情况下需要加入一种或数种生长因子营养缺陷型菌种，如谷氨酸发酵中使用的菌种为生物素缺陷型2341五、生长因子六、前体物质前体物质(Precursor)：最终所需的代谢产物的前身或其结构中的一部分。在生物合成中直接结合到产物分子中，自身结构变化不大，能显著提高产量的小分子物质。抗生素(Antibiotin)发酵中常用的前体物质：抗生素前体物质青霉素Ｇ苯乙酸（或在发酵中生成苯乙酸的物质）链霉素肌醇、精氨酸、甲硫氨酸红霉素丙酸、丙醇、丙酸盐、乙酸盐青霉素G青霉素V六、前体物质影响前体物质效力的因素菌种的特性前体物质的投入量(Inoculationconcentration)前体物质的毒性(Toxicity)苯乙酸用量（％）青霉素产量（单位/ml)青霉素Ｇ比例（％）0.1７７５０57.30.2８５１５73.00.3９６３０90.60.4９２００95.6促进剂Accelerator（刺激剂Stimulant）并非前体或营养物，可影响正常代谢或中间代谢物积累、或提高次级代谢物的产量的一类刺激因子。作用原理：改变细胞的渗透性，或“启动”微生物体内的生产部位，否则这些部位是被阻遏的，因此促进剂的添加可以大大提高产量。常用促进剂：各种表面活性剂Surfactant（洗涤剂、吐温80、EDTA、植酸等）、大豆油提炼物、甲醇等。010302七、促进剂和抑制剂七、促进剂和抑制剂Org.Biomol.Chem.,2009,7,1753–1760|1753七、促进剂和抑制剂抑制剂(Inhibitor)的作用原理：通过抑制某些合成其它产物的途径而使所需产物的合成得到加强。抗生素生产中的抑制剂：抗生素被抑制的产物抑制剂链霉素甘露糖链霉素甘露聚糖四环素金霉素溴化物、硫脲等头孢霉素C头孢霉素NL-蛋氨酸利福霉素B其它利福霉素巴比妥药物八、水分