相互作用生物传感相关技术课件.ppt

3相互作用及界面研究相关技术电化学三电极系统工作电极（Workingelectrode）参比电极（Referenceelectrode）对电极（Auxiliaryelectrode）电极：在电化学电池中赖以进行电极反应和传导电流从而构成回路的部分。基本原理3相互作用及界面研究相关技术工作电极金电极热解石墨电极玻碳电极基本原理参比电极饱和甘汞电极Ag/AgCl电极对电极铂片电极铂丝电极绝对电极电位无法得到，因此只能以一共同参比电极的标准电极电势为参照进行测量。对电极一般使用惰性贵金属材料，以免在此表面发生化学反应，用于与工作电极形成回路。工作电极，是三电极中，最为重要的一个，需要关注的化学和生物过程均在此电极上发生。3相互作用及界面研究相关技术抗体–抗原相互作用+Kasskdiss抗体 抗原 复合物Ab:Ag基本原理3相互作用及界面研究相关技术金石英基体? ??’ ?’100%强度6%intensity100%强度100%强度6%强度基本原理3相互作用及界面研究相关技术X-轴:角度Y-轴相对反射率(%)基本原理??’SPR共振角3相互作用及界面研究相关技术表面附近折射率的变化镀金膜能量状态的变化SPR共振角度变化,在此角度上镀金膜吸收光能产生共振仪器检测SPR角度变化,进而告诉我们表面发生的变化:Δ?=120m°?0.001的折射率变化,或者?1ng/mm2的表面吸附 (仪器激光照射点的面积为2.5mm2)基本原理3相互作用及界面研究相关技术ni:RefractiveIndexinEachMedium(i:1=Prism,2=Metal,3=Sample)?:IncidentAngleofLightqIncidentLightDetectorn1n2n3KretschmannConfigurationResonanceAngleShiftRefractiveIndexChangeofSensingLayeronChipResonanceAngleChangeMolecularInteractionResonanceCondition基本原理3相互作用及界面研究相关技术基本原理4.解离段5.再生段6.重回基线1.基线2.结合段3.平衡段1345623相互作用及界面研究相关技术SPR仪测量池镀金膜二极管检测器折射镜激光偏振滤镜扫描镜透镜旋转手柄紧固螺栓光学系统3相互作用及界面研究相关技术SPR仪3相互作用及界面研究相关技术混合泵蠕动泵测量池SPR仪3相互作用及界面研究相关技术SPR测量池SPR仪3相互作用及界面研究相关技术SPR仪3相互作用及界面研究相关技术BK-7玻璃,n=1.521mm厚度浸没油,折射率n=1.518半圆柱棱镜4°4°单色激光,670nm?(波长)Au,镀金膜,50nm厚度镀金片钛涂层,1.5nm厚度.将金粘结到玻璃片上的载体层.SPR仪溶液3相互作用及界面研究相关技术 Activation:EDC:N-(3-dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimide NHS:N-hydroxysuccinimide Au巯基十一酸SHOHOSHOHOSHOHOSHOHOSPR的应用3相互作用及界面研究相关技术抗体封闭:氨基乙酸(也叫甘氨酸)或乙醇胺 Au巯基十一酸SHOHOSHOHOSHOHOSHOHOSPR的应用3相互作用及界面研究相关技术抗体 Au巯基十一酸SHOHOSHOHOSHOHOSHOHO抗原SPR的应用3相互作用及界面研究相关技术Biotin-thiolEthyleneglycol-thiolBiotinStreptavidinssDNA-biotinTargetDNAOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOH