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2638重庆医学2013年8月第42卷第22期
·技术与方法·
原代乳小鼠心肌细胞的分离培养及鉴定
程阔菊，黄河，杜智勇，李洪，杨天德△
(第三军医大学新桥医院麻醉科，重庆400037)
摘要：目的建立原代乳小鼠心肌细胞的培养方法，评价心肌细胞的存活状况并鉴定心肌细胞纯度。方法应用胰酶联合
胶原酶共同消化3d内C57乳小鼠心脏，台盼蓝染色判断心肌细胞存活率，d—actin免疫荧光染色鉴定心肌细胞纯度。结果利用
3d内乳鼠心脏可成功培养原代小鼠心肌细胞，台盼蓝染色显示细胞存活率大于95，a—actin免疫荧光染色显示心肌细胞纯度达
95以上。结论严格控制实验条件，可成功培养高存活率和高纯度的小鼠心肌细胞。
关键词：乳小鼠；心肌细胞；分离；纯化；培养；鉴定
doi：10．3969／j．issn．1671—8348．20i3．22．026文献标识码：A文章编号2013)22—2638一O3
Isolation·cultureandidentificationofneonatalmousecardiomyocytes
ChengKuoju，HuangHe，DuZhiyong，LiHong，YangTiande
(DepartmentofA，2Ps￡^8s0Z0g，XinqiaoHospital，theThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400037，China)
Abstract：0bjectiveToestablishamethodtoisolate，cultureandidentifycardiomyocytesfromneonatalmouse，estimatethe
cardiomyocytessurvivalrate，andidentifythepurityofcardiomyocytes．MethodsNeonatalC57mouseheart(within3days)wasdi—
gestedusingtrypsinandcollagenase．Cardiomyocytessurvivalratewasestimatedbytrypanbluestaining，andcardiomyocytespurity
wasidentifiedbyd—actinimmunofluoreseeneestaining．ResultsMousecardiomyocytescouldbesuccessfullyisolatedandcultured
usingneonatalmousewithin3days．Trypanbluestainingshowedcardiomyocytessurvivalratewas95，andcardiomyocytespu—
ritywasmorethan95demonstratedbyd—actinimmunofluorescencestaining．ConclusionUnderthestrictexperimentalcondi—
tions，mousecardiomyocytescanbesuccessfullyisolatedandculturedwithhighsurvivalrateandhighpurity．
Keywords：neonatalmouse；cardiomyocytes；separation；purification；culture；identification
各种基因敲除及转基因小鼠已广泛应用于心血管疾病动Alexagoatanti—mouseIgG(H十L)(Invitrogen)。
物模型的建立，已为心血管疾病机制的研究作出了巨大贡献。1．2方法
体外心肌细胞培养作为一种体外实验研究模型，可以排除神1．2．1心肌细胞培养方法乳鼠75乙醇全身消毒，眼科剪
经、体液的干扰而独立地从细胞和分子水平研究心血管疾病
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