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动物实验的一般操作
实验过程中技术及生物材料的收集是否恰当,直接影响实验结果的质量。因此,实验人
员必须正确地掌握动物实验中的一般操作技术,包括动物的捉拿、固定、性别鉴定、标记、
生物材料的收集、处死方法和解剖检查,这是保证实验工作成功的基本条件之一。
一、实验动物的捉拿固定
实验动物的正确捉拿和固定,不但可以避免由于过强的刺激和动物的损伤而影响观测结
果的正确性,而且还可防止被动物咬伤,从而保证实验的顺利进行。常用的小鼠、大鼠及家
兔的捉拿固定方法如下:
(1)小鼠
用右手抓住鼠尾,提出后立即放在铁丝笼或粗糙的板面上,而后右手将小鼠缓缓后拉,
恰好与鼠要向前爬行的力相反而使其固定,此时可用左手的姆指和食指捏住小鼠耳后枕颈部
皮肤即可提起,掌心向上而将鼠体置于掌心中,用无名指和小指将鼠尾压住。此时小鼠即被
固定好,可以进行各种实验操作。操作熟练后,可采用左手一手抓取法,更为方便,右手可
不必放下注射器等器具。
(2)大鼠
捉取大鼠时,不宜突然袭击式地去抓它,这样手指容易被咬伤。取用时,应轻轻抓住其
尾巴后提起,置于实验台上,将其放入大鼠固定盒将鼠固定,这样可进行尾静脉取血或注射。
如要作腹腔注射或灌胃操作时,实验者应戴上帆布手套,右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉,
左手抓紧鼠二耳和头颈部的皮肤,并将鼠固定在左手中,右手即可进行操作。
(3)家兔
家兔性情一般较温顺而胆小,捉拿动作要轻。家兔二耳较长,但并不能承担全身重量,
因此捕捉家兔不能抓其两耳,使它疼痛而挣扎。从笼内捉兔时,先轻轻打开笼门,勿使受惊,
随之将手伸入宠内,从头前阻拦它跑动,兔便匍伏不动,此时用右手把二耳轻轻地压于手心
内,抓住颈部的被毛与皮,提起兔,然后用左手托住它的臂部,兔身的重量大部分落于左手
上。家兔的固定按实验要求而定,如在耳血管采血、注射、观察瞳孔及呼吸变化时,可将家
兔装入能使头部露出的特制木箱。做心脏抽血时,可将其仰卧固定在简易木质手术台上,头
部用特制兔头夹固定,四肢用活结粗棉扁带缚在台边。
二、实验动物的标记方法
确定作为实验用的动物,应分别进行编号登记。选择何种编号、登记的标记方法,则依
据实验动物数量、观察时间长短而定。
(1)皮毛涂色法
常用于大鼠、小鼠、豚鼠等实验动物。即以苦味酸饱和酒精溶液(黄色)代表个位数;中性
红(或品红)溶液(红色)代表十位数,涂在动物体表特定部位的皮毛上,不同部位代表不
同数目,如下图1-2所示。
(2)剪耳标记法
在动物耳朵边缘不同部位剪口或耳朵不同部位剪一小孔,以代表一定的数序。此种标记
方法清楚,保存时间长,适用于较长期进行试验观察时采用。
(3)烙印法
用刺激钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的墨黑在刺号上加以涂抹,
烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。
(4)用金属制的号牌固定于实验动物的耳上,大动物可系于颈上
对于猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记,只记录它们的外表和毛色即可。
三、实验动物性别鉴别
受试物不同性别可有不同的毒性作用,或由于目的要求不同,往往需选用不同性别的动
物进行试验观察。
大鼠和小鼠的性别鉴定,见实验表1-l。
实验表1-1雌鼠和雄鼠的鉴别
雄性(♂)雌性(♀)备注
生殖器离肛门较远,阴部有毛生殖器生殖器离肛门较近,生殖器和肛门间无毛生殖器呈圆仔鼠性别主要以生殖器距肛门
呈圆尖形突出会阴处有睾丸,有时升形且有凹槽和阴道开口胸腹部有明显的乳头(大鼠6远近来鉴别,雄性距离远,雌
入腹腔对,小鼠5对)性距离近
四、实验动物的分组
实验时,在动物数量较多的情况下,必须进行分组。为避免主观上有意或无意地偏见,
减少因其他个体因素带来的偏差,使实验结果比较准确可靠,因此,实验动物均应采用随机
分组的方法。常用的随机分组方法有:
(1)随机区组法
例如欲将42只大鼠分配于7个组内,每组6只鼠,可按如下方式进行。将大鼠逐个称
体重,体重接近的7只鼠同置于一笼中(每鼠作上记号并登记体重)为一个区组。共计6个
区组,然后从1~7号编7个签,于第一宠内任取一鼠,同时抽签得3号,此鼠则放入第
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