基因工程的基本工具(公开课).pptVIP

作用部位：是磷酸二酯键（扶手）不是氢键（梯子）DNA连接酶将两条DNA链连接起来的酶。连接黏性末端连接黏性末端和平末端分类作用E.coliDNA连接酶连接酶种类：T4DNA连接酶DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链连接部位双链在两DNA片断之间形成磷酸二脂键单链将单个核苷酸加到已存在的核酸片断3’末端形成磷酸二脂键核苷酸分子的连接：ATGCATGCDNA聚合酶连接单链DNA把单个脱氧核苷酸连接到DNA片段上设想一培养抗虫棉呢？微生物生长迅速，容易控制。于是科学家设想，若能将人的胰岛素基因导入微生物体内，并得以表达，就不仅能解决产量问题，还能大大降低生产成本，使药品价格大幅下降。A设想二B能否让微生物产生出人的胰岛素等珍贵药物？C这些定向改造基因的设想能实现吗？经过多年的努力，科学家终于在20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程12基因工程的概念基因工程：指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作DNA重组技术或基因拼接技术。基因工程的概念基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程实质结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平人类需要的基因产物剪切→拼接→导入→表达基因重组苏云金芽孢杆菌基因工程培育抗虫棉的简要过程：抗虫棉的培育有哪些关键步骤？提取抗虫基因普通棉花(无抗虫特性)棉花细胞(含抗虫基因)与运载体DNA拼接，导入棉花植株(有抗虫特性)表达解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？基因工程培育抗虫棉的关键步骤：01关键步骤一：02抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来03关键步骤二：04抗虫基因与棉花DNA“缝合”05关键步骤三：06抗虫基因进入棉花细胞07解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？01“分子手术刀”——限制性核酸内切酶02“分子缝合针”——DNA连接酶03“分子运输车”——基因进入受体细胞的载体04本节知识内容DNA重组技术的基本工具1-1DNA重组技术的基本工具“分子手术刀”──限制酶“分子运输车”──基因进入受体细胞的载体“分子缝合针”──DNA连接酶专题一基因工程识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。主要是原核生物4000种。1、来源：2、种类：3、作用：5、结果：形成两种末端一、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶黏性末端平末端4、切割方式：错切和平切ATGCATGC限制酶切割磷酸二酯键限制性内切酶作用过程点击播放大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开形成黏性末端。SmaⅠ能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切割形成平末端。0102常见的两种限制酶SmaⅠ平末端平末端EcoRⅠ黏性末端黏性末端什么叫黏性末端？当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。什么叫平末端？当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。GAATTC基因的针线：DNA连接酶

GAATTCCTTAAGCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割二、分子缝合针——DNA连接酶ATGCATGC连接酶连接磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程：磷酸二酯键T1234512345A