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为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平。——张载
血清肌酸激酶MB同工酶测定
1检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果
的准确。
2实验原理
使用CK-M多克隆抗体对肌酸激酶(CK)中CK-M同工酶
的活性进行抑制后,采用德国临床化学会(DGKC)和国际临
床化学会(IFCC)推荐的连续监测法测定余下的肌酸激酶
(CK)活性。其反应原理如下:
⑴CK-MM型同工酶+CK-M抗体→CK-MM型同工酶的活
性被抑制;CK-MB型同工酶+CK-M抗体→50%的CK-MB型
同工酶的活性被抑制;
⑵剩余的50%无活性的CK-MB型同工酶+N-乙酰半胱氨
酸→有活性的CK-B型同工酶
CK同工酶
⑶磷酸肌酸+ADP肌酸+ATP
己糖激酶(HK)
为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平。——张载
ATP+葡萄糖ADP+葡萄糖-6-磷酸
(G6P-DH)
+
葡萄糖-6-磷酸+NADP6-磷酸葡萄糖酸
+
+NADPH+H
式中:ADP为二磷酸腺苷;ATP为三磷酸腺苷;NADP+为
氧化型辅酶II;NADPH+H+为还原型辅酶II。
在上述反应中,NADPH+H+的生成速率与样本中肌酸激酶
B型同工酶(CK-B)的活性成正比。通过在波长340nm处监
测吸光度值的上升速率,即可测得样本中肌
酸激酶B型同工酶(CK-B)的活性。肌酸激酶B型同工
酶(CK-B)活性相当于1/2肌酸激酶MB型同工酶的活性,
将所测得的肌酸激酶B型同工酶(CK-B)的活性乘以2,即
为肌酸激酶MB型同工酶(CK-MB)的活性。
3标本:
3.1病人准备:无特殊。
3.2类型:血清或肝素血浆。
为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平。——张载
3.3标本存放:稳定性:-20℃保存稳定4周(避光保存)。
活性损失:2~8℃保存24小时或18~22℃保存1小时至少
损失10%。
3.4标本运输:常温条件下保存运输。血标本应尽快送往化
验室,室温下放置30―45分钟,后离心,放置时间不得超过3h.
血清必须吸出,转移至有盖的试管中.
3.5标本拒收标准:细菌污染的标本。
4实验材料
4.1试剂:上海复星长征医学科学有限公司CK-MB试剂盒(沪
食药监械(准)字2014第2400166号YZB/沪1546-40-2014)
4.1.1试剂组成
试剂1(R1):
D-葡萄糖27mmol/L咪唑缓冲液
60mmol/L
乙酸镁
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