兽医药理学实验.pptVIP

如果试验结果最高死亡率在80～100%之间，最低死亡率在20～0%之间，可用下列公式求得校正值：LD50=log-1[Xm-i(∑p-(3-Pm-Pn)/4]式中：Pm—最高死亡量组Pn—最低死亡量组01020304肝脏是药物代谢的主要器官，而药物的代谢主要靠酶的催化。在肝细胞内有专门催化药物等外源性化学物质代谢的微粒体酶，简称药酶。四氯化碳是一种对肝细胞有严重毒害作用的化学物质，可引起中毒性肝炎，使肝脏对药物的代谢能力降低。本实验用四氯化碳损害小白鼠的肝脏，使肝药酶活性受到抑制，从而减缓对硫喷妥钠的代谢，使麻醉时间延长。实验目的实验目的通过实验，观察肝损伤后对药物作用的影响。实验五肝脏损伤对药物作用的影响给健康小白鼠注射四氯化碳（0.1mL/10g)，造成肝损伤，后用0.3%硫喷妥钠注射(0.15mL/10g)，与健康小白鼠对照，比较它们麻醉出现及维持的时间的不同；解剖所有小白鼠，分别观察它们肝和肾的病理变化，并与健康小白鼠比较。实验内容实验仪器、设备仪器：注射器，针头，天平，鼠笼。药物：四氯化碳、硫喷妥钠实验记录肝脏损伤对药物作用的影响注意事项“麻醉开始时间“为小鼠从腹腔注射硫喷妥钠溶液后至翻正反射消失时间；“麻醉消失时间”为从翻正反射消失至翻正反射恢复的时间。鼠号体重（g）硫喷妥钠剂量（mL）注射时间麻醉开始时间麻醉维持时间健康鼠肝损鼠学习内容药物敏感实验——纸片法定量药敏实验——试管二倍稀释法学习要求掌握两种药物敏感实验的原理、方法及注意事项。实验六药物敏感性实验抗菌药物敏感性试验（AST，简称药敏试验）：用于测试抗菌药物在体外对病原微生物有无抑制作用。常用最低抑菌浓度（MIC）表示，即体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度。通常根据MIC结合常用剂量时体内该药所能达到的血药浓度，划定细菌对各种抗生素敏感或耐药的界限，给出S（敏感）、I（中介）、R（耐药）等定性的结果，方便临床用药。检测病原菌对各种抗生素的敏感性，指导临床合理用药。用于流行病学调查及院内感染的监控，控制和预防耐药菌株的流行。为经验用药提供参考依据。方法：扩散法（纸片法）、稀释法（有琼脂稀释法和液体稀释法）定性滤纸用打孔器打成直径6mm的圆片，每100片放入一小瓶中，160℃干热灭菌1---2小时，或用高压灭菌（6.8kg30min）后在60℃条件下烘干。（此应提前做好）青霉素200U/ml其它抗菌药物1000ug/ml庆大霉素4万单位/ml，稀释为1000单位/ml。抗菌药物的浓度（指有效药物浓度）磺胺类药物10mg/ml中草药制剂1g/ml（临床上可按照药品使用说明书，如上面标明5克本品可拌50千克饲料，其换算方法为l克本品可拌10千克饲料，也就是1克本品拌l0000克饲料，相当于药品浓度为l克本品加l0000毫升蒸馏水。）药敏纸片的人工制作培养皿烘干法：将浸有抗菌药液的纸片摊平在培养皿中，于37℃的温箱内保持2--3小时即可干燥，或放在无菌室内过夜干燥。用无菌操作法将欲测的抗菌药物溶液1ml，加入100片纸片中，置冰箱内1—2小时，用下列方法烘干：01干燥的药敏纸片可保存6个月。使用前用标准的敏感菌株做药物敏感实验，若抑菌环比原来小，则表明该纸片已失效。将制好的各种药物纸片装入无菌小瓶中，置冰箱内保存备用。并用标准敏感菌株做敏感性实验，记录抑菌环的直径。02每组约7-8个平皿（每人1个），每个平皿约20毫升琼脂培养基，即约200ml。按照每组500毫升琼脂培养基、100毫升肉汤培养基准备。每平皿约4张纸片，每班约240张以上。用镊子夹纸片，每个平皿贴4张纸片，要使纸片全部紧贴培养基。为保证均匀，可于平皿背部划出贴纸片点。将琼脂培养基熔融后，每个平皿倒入约20毫升，晾干后，用玻棒蘸含菌棉球（玻棒、棉球均事先消毒）涂抹均匀后晾干。36摄氏度培养过夜。测量宽度。纸片法每组2排试管，每排10支。共80支。将庆大霉素用肉汤稀释液成64微克/毫升。每班20毫升即可。挑选10支无菌试管编号1—10。无菌加入1.0毫升肉汤至第2到10管内。将64微克/毫升庆大霉素液体，分别加1.0毫升至第1、2管，将第2管混合后取1.0毫升至第3管，依次至第9管，再从第9管取1.0毫升丢去，第10管不加抗生素作阳性对照。试管稀释法另准备肉汤管不加抗生素、细菌作阴性对照。01020304试管稀释法第1—10管分别加入已增菌6小时的细菌浓度约为105-106cfu/ml菌液1.0毫升（细菌菌龄为16-18小时，McFarlandNo0.5管细菌浓度1.5×108cfu/ml，