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BJS
食品补充检验方法
BJS202411
制品、
谷物碾磨粉及淀粉及制品中
植物源性成分定性检测
2024-12-22发布
国家市场监督管理总局发布
BJS202411
制品、
谷物碾磨粉及淀粉及制品中
植物源性成分定性检测
1范围
本方法规定了谷物碾制品、制品中植物源的检测方法。
磨粉及淀粉及性成分
本方法适用谷物碾磨粉及制品(粉、粒、片及其冲调类制品)、淀粉及制品(粉丝、粉条、藕粉及其冲调
类制品等)中可能含有一种植物源性成分的Sanger基因测序及可能含有多种植物源性成分的高通量基
因测序定性检测。可鉴别植物物种列表见附录A。
2原理
提取试样中基因组DNA,以DNA用植物叶绿体基因通用引物进行PCR扩增,
为模板,使(McL)
测序后属植物实现样品中植检测。
将扩增片段与数据库比对,确定序列所物种,物源物种成分的定性
3试剂和材料
除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂。试验用水符合GB/T6682中一级水的要求。所有试剂
均用无DNA酶污染的容器分装。
3.1植物源rbcL基因检测用引物对序列
rbcL-F:5AATCTTCTACTGGTACATGGAC-3\
rbcL-R:5-TCATCATCTTTGGTAAAATCAAG-3。
rbcL基因片段电泳长度为433bp左右。
3.2试剂
H
3.2.1十六烷基三甲基澳化镂(CTAB,G”BrN)。
9
3.2.2氯化钠(NaCl)。
3.2.3二水乙二胺四乙酸二钠盐•O,C10•2H2O)o
(Na*DTA2H2H14N2O8Na2
3.2.4三羟甲基氨基甲烷(TriSQHnNOa)。
3.2.5盐酸(HC1)。
3.2.6氢氧化钠(NaOH)。
3.2.7十二烷基肌氨酸钠(CsHzKNaOs)。
3.2.8RNA酶:10mg/mL。
3.2.9蛋白酶K:20mg/mL。
3.2.10苯酚(CeHQ)。
3.2.11三氯甲烷(CHCh)。
3.2.12125mmol/LNa2EDTA0
3.2.13乙酸钾(QH2)。
3Ko
3.2.14冰乙酸(C2H4O2)。
1
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3.2.15异丙醇(C))。
3Hse
3.2.16无水乙醇(CzHeO)。
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