BJS 202401食品中动物源性成分定性检测.pdf

BJS

食品补充检验方法

BJS202401

食品中动物源性成分定性检测

2024-12-22发布

国家市场监督管理总局布

BJS202401

食品中动物源性成分定性检测

1范围

本方法规定了食品中动物源性成分的检测方法。

本方法适用于食品中可能含有的一种或者多种哺乳类、禽类、鱼类等动物源性成分的高通量测序定

性检测。

可鉴别动物物种列表见附录A。

本方法检出限为1%（质量分数）。

2原理

针对动物线粒体基因（m/DNA）片段设PCR引物增片段

的相对保守计通用，将扩与数据库比对，确

定所实现样检测。

属动物物种，品中动物源物种成分的定性

3试剂和材料

除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。所有试剂均用无

DNA酶污染的容器分装。

3.1引物

引物序列见表1。

表1引物序列

引物类型引物序列片段大小基因名称

上游引物5?-adapter-GGTAAAWYTYGTGCCAGCCA-3,20bp12srRNA

下游引物5?-adapter-GCATAGTGGGGTATCTAATCCYAG-324bp12SrRNA

注：表中含简并碱基，其中碱基w代表碱基A/T,碱基Y代表碱基C/T。adapter表示接头，为一段短核昔酸序

歹1用于标测序片段。

」，连接目

3.2试剂

3.2.1十六烷基三甲基溟化镂（CTAB’CigH^BrN）。

3.2.2氯化钠（NaCl）。

3.2.3乙二胺四乙酸二钠盐（Naz-EDTACoH^NzOsNaz）。

3.2.4•HC1,C4H11NO3•HC1）

三羟甲基氨基甲烷盐酸盐（Tris。

3.2.5盐酸4moi/L。

（HCD：

3.2.6苯酚（CeO）。

6H

3.2.7三氯甲烷（CHCh）。

1

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3.2.8异戊醇（CsHiQ）。

3.2.9无水乙醇（QHQ）。

3.2.10异丙醇©HQ）。

3.2.11琼脂糖（C24H3Q1Q,泳级。

电

3.2.12DNA电泳分子量标准品50bp〜500bp。

：

3.2.13蛋白酶K20/mL。

：mg

3.2.14文库集纯化磁珠。

3.2.15PCR扩增预混液：包含DNA聚PCR离子、稳定剂和增强剂。

合酶、缓冲液、