实验DNA的粗提取课件苏教版必修.pptVIP

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*****************教学目标知识目标学生能够掌握DNA的粗提取原理,了解DNA的分子结构和主要特征,并能够运用实验操作提取DNA。技能目标学生能够熟练掌握DNA粗提取的实验步骤和操作方法,并能够根据实验结果分析和讨论,得出相关结论。情感目标学生能够培养科学探究能力、实验操作能力和分析问题的能力,并能体会科学研究方法和严谨的科学态度。教学重点和难点DNA提取原理了解DNA的结构和性质,并掌握提取DNA的原理。实验操作熟练掌握DNA提取实验的步骤和方法,如细胞破碎、蛋白质降解、DNA沉淀等。实验结果分析能对实验结果进行分析,并解释实验现象。实验原理细胞破碎使用洗涤剂破坏细胞膜,使DNA释放到溶液中。蛋白质降解使用蛋白酶降解细胞中的蛋白质,避免其与DNA结合。DNA分离利用DNA在不同浓度的酒精溶液中溶解度的差异,将DNA分离出来。DNA的分子结构DNA是脱氧核糖核酸的缩写,是生物体遗传信息的载体,其结构如同螺旋梯。DNA由两条反向平行的脱氧核苷酸链组成,通过氢键连接,形成双螺旋结构。每条链由脱氧核糖和磷酸交替连接,形成主链,碱基连接在脱氧核糖上。碱基包括腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C),并按照A与T、G与C配对原则连接。DNA提取的步骤细胞破碎利用物理或化学方法破坏细胞壁和细胞膜,释放出细胞内的DNA。蛋白质降解加入蛋白酶,消化细胞中的蛋白质,防止蛋白质与DNA结合影响DNA的提取。DNA分离利用DNA和蛋白质在不同溶液中的溶解度差异,将DNA从蛋白质中分离出来。DNA沉淀加入乙醇或异丙醇,使DNA从溶液中析出沉淀,便于收集。DNA干燥将DNA沉淀干燥,去除残留的乙醇或异丙醇,避免影响后续操作。DNA重悬将干燥的DNA溶解于适当的缓冲液中,得到提取的DNA溶液。准备实验材料新鲜的猪血猪血含有丰富的细胞核,可作为提取DNA的理想材料,并易于获取。洗涤剂洗涤剂是一种温和的表面活性剂,能有效破坏细胞膜,释放出细胞核中的DNA。食盐食盐可提供高浓度的盐离子环境,使DNA与蛋白质分离,方便提取DNA。冰水冰水可以降低反应温度,减缓DNA降解,保证实验结果的准确性。DNA提取的操作流程1细胞破碎裂解细胞膜,释放DNA2蛋白质降解去除蛋白质,避免干扰DNA提取3DNA分离分离DNA,避免其他物质干扰4DNA沉淀收集DNA,便于观察和保存5DNA干燥去除水分,防止DNA降解整个操作流程需要在低温环境下进行,避免DNA降解。步骤一:取材料选择新鲜的草莓作为实验材料,草莓富含DNA,方便提取。11.清洗用自来水冲洗草莓,去除表面灰尘和杂质22.切割将草莓切成小块,增加细胞破碎的效率33.称重称取约5克草莓块,确保提取的DNA量足够观察步骤二:细胞破碎1原理将细胞壁和细胞膜破坏,释放出细胞内的DNA。2方法物理方法:研磨或超声波破碎化学方法:溶解剂或酶解3注意事项避免过度破碎,以免DNA断裂。步骤三:蛋白质降解1蛋白酶的作用蛋白酶能够特异性地水解蛋白质,将蛋白质降解成更小的多肽或氨基酸。2常用的蛋白酶常用的蛋白酶包括胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶等,它们的最佳作用条件不同。3蛋白质降解的作用去除蛋白质可以避免DNA被蛋白质包裹,有利于后续的DNA提取和纯化。步骤四:DNA分离1加入氯仿氯仿的密度大于水,会沉到水层下方。2离心离心后,溶液会分层。3收集上清液DNA位于水层中,小心地收集上清液。氯仿是一种有机溶剂,可以将蛋白质和脂类等杂质从DNA中分离出来。离心后,溶液会分成三层:上层是水层,中间层是氯仿层,下层是沉淀物。DNA位于水层中,小心地收集上清液即可。步骤五:DNA沉淀DNA沉淀是提取实验的关键步骤之一。加入乙醇,DNA会在乙醇溶液中析出,形成白色絮状沉淀,这一过程被称为DNA沉淀。1加入乙醇乙醇能降低DNA的溶解度,使其从溶液中析出。2形成沉淀DNA会形成白色絮状沉淀。3观察沉淀通过观察沉淀,可以判断DNA提取是否成功。步骤六:DNA干燥去除水分将试管倾斜,用吸水纸轻轻吸干试管壁上的水珠,注意不要吸到DNA沉淀物。避免污染避免吸水纸接触到DNA沉淀物,防止DNA被吸走或污染。保存DNA干燥后,DNA可以保存在室温或冰箱中保存,方便后续的实验操作。步骤七:重悬DNA1加入缓冲液加入适量的TE缓冲液,该缓冲液可使DNA溶解并稳定,防止DNA降解。2轻轻摇晃轻轻摇晃试管

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