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分析化学课件9色谱法

contents目录色谱法概述色谱法基本理论色谱法仪器设备及操作各类色谱法技术特点及应用样品前处理与进样技术数据处理与结果分析实验设计与优化策略

01色谱法概述

定义色谱法是一种物理分离技术，它利用物质在固定相和流动相之间的分配平衡，将复杂样品中的各组分分离开来。原理色谱法的分离原理是基于物质在固定相和流动相之间的分配平衡。当样品通过色谱柱时，各组分在固定相和流动相之间进行多次分配，由于各组分的分配系数不同，因此它们在色谱柱中的迁移速度也不同，从而实现分离。色谱法定义与原理

根据固定相和流动相的状态，色谱法可分为气相色谱法、液相色谱法、超临界流体色谱法等。色谱法在化学、化工、环境、医药、食品等领域都有广泛的应用，如环境监测中的大气、水质分析，食品药品中的添加剂、农药残留检测等。色谱法分类及应用领域应用领域分类

色谱法起源于20世纪初的俄国植物学家Tswett，他首次使用色谱法分离植物色素。随着科技的发展，色谱法不断得到改进和完善，逐渐成为一种重要的分离分析技术。发展历史目前，色谱法已经成为化学分析领域不可或缺的技术之一。随着新材料、新技术的不断涌现，色谱法的分离效率、分辨率和检测灵敏度不断提高，为复杂样品的分离分析提供了更加准确、快速的方法。同时，色谱法也面临着一些挑战，如复杂基质的干扰、痕量组分的检测等，需要不断研究和探索新的方法和技术。现状色谱法发展历史及现状

02色谱法基本理论

分离度（Resolution）色谱峰之间的分离程度，用两个相邻色谱峰之间的距离来衡量。分离度越大，表明两个组分在色谱柱上的分离效果越好。分辨率（ResolvingPower）色谱柱对相邻两组分的分辨能力，用两个相邻色谱峰的保留时间之差与两组分色谱峰底宽之和的一半来衡量。分辨率越高，表明色谱柱对相邻组分的分辨能力越强。分离度与分辨率概念

塔板理论与速率理论将色谱柱看作由许多小段组成，每小段称为一个“塔板”，组分在每段塔板上进行多次分配平衡。塔板数越多，表明色谱柱的分离效果越好。塔板理论（PlateTheory）从传质动力学角度描述色谱过程，考虑组分在流动相和固定相之间的传质阻力对分离效果的影响。速率理论可以解释色谱过程中的各种异常现象，如色谱峰拖尾、前伸等。速率理论（RateTheory）

保留值（RetentionValue）表示组分在色谱柱上的保留程度，用保留时间（tR）或调整保留时间（tR）来表示。保留时间越长，表明组分在固定相上的吸附越强。要点一要点二选择性因子（SelectivityFactor）又称分配系数比，表示相邻两组分在固定相和流动相中分配平衡常数的比值。选择性因子越大，表明两组分在固定相上的吸附差异越大，越容易实现分离。保留值与选择性因子

03色谱法仪器设备及操作

常用色谱仪器介绍气相色谱仪由气路系统、进样系统、分离系统、检测系统、温控系统、记录系统组成，用于挥发性有机物的分离和分析。液相色谱仪由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统组成，适用于高沸点、热稳定性差、相对分子质量大的有机物的分离和分析。凝胶色谱仪由溶液储存器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪组成，用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。

数据采集与处理启动数据采集系统，记录色谱图及相关数据，并进行必要的处理和分析。进样与洗脱按照规定的进样量进行进样，选择合适的洗脱液及洗脱程序。参数设置根据实验要求设置合适的参数，如温度、压力、流量等。操作前准备检查仪器各部件是否完好，连接是否紧密，确保电源接地良好。开机与预热按照仪器使用说明书要求开机，并进行预热，确保仪器处于稳定状态。仪器操作规范与注意事项

保留时间变化峰形异常基线漂移无峰或峰很小故障诊断与排除方法可能原因包括柱温变化、流动相组成变化等，解决方法包括调整柱温、重新配制流动相等。可能原因包括流动相不纯、检测器污染等，解决方法包括更换流动相、清洗检测器等。可能原因包括进样量过大、色谱柱污染等，解决方法包括减少进样量、清洗或更换色谱柱等。可能原因包括进样针堵塞、检测器故障等，解决方法包括清洗或更换进样针、检查并修复检测器等。

04各类色谱法技术特点及应用

利用吸附剂（固定相）对样品中各组分吸附能力的差异，使各组分在移动相（展开剂）中分离。原理特点应用操作简便、快速，设备简单，分离效果好，适用于少量样品的分离和纯化。广泛应用于药物、农药、食品、环境等领域中复杂样品的分离和鉴定。030201薄层色谱法（TLC）

利用高压输液系统将流动相泵入色谱柱，通过色谱柱内填充的固定相对样品中各组分进行分离。原理分离效能高、分析速度快、灵敏度高、适用范围广。特点广泛应用于生物医药、化工、食品、环境等领域中复杂样品的分离和分析。应用高效液相色谱法（HPLC）

利用气体作为流动相，