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傳染病的診斷正確的早期診斷是有效治療的先決條件,又是早期隔離患畜(者)所必需。傳染病的診斷要綜合分析下列三個方面的資料。
6.傳染病的診斷臨床資料流行病學資料實驗室檢查病理學檢查病原學檢查(病原體的直接檢出病原體分離)分子生物學檢測免疫學檢測(特異性抗體檢測特異性抗原檢測免疫學檢測)
6.1臨床資料全面而準確的臨床資料來源於詳盡的病史和全面的體格檢查。起病方式有鑒別意義,必須加以注意。熱型及伴隨症狀、腹瀉、頭痛、黃疽等症狀都要從鑒別診斷的角度來加以描述。進行體格檢查時不要忽略有診斷意義的體征如疹斑等。
6.2流行病學資料流行病學資料在傳染病的診斷中佔有重要的地位。由於某些傳染病在發病年齡、季節及地區方面有高度選擇性,考慮診斷時必須取得有關流行病學資料作為參考。預防接種史和過去病史有助於瞭解患畜免疫狀況,當地或同一集體中傳染病發生情況也有助於診斷。
6.3實驗室檢查傳染病的診斷具有特殊的意義,因為病原體的檢出和分離培養可直接確定診斷,而免疫學檢查亦可提供重要根據。對許多傳染病來說,一般實驗室檢查對早期診斷也有很大幫助。
一般實驗室檢查包括血液,大、小便常規檢查和生化檢查。血液常規檢查中以白細胞計數和分類的用途最廣。白細胞總數顯著增多常見於化膿性細菌感染如敗血症;革蘭陰性桿菌感染時白細胞總數往往升高不明顯甚至減少,例如布氏菌病、傷寒及副傷寒等。病毒性感染時白細胞總數通常減少或正常,如流感、病毒性肝炎等。嗜酸粒細胞減少則常見於傷寒、流行性腦脊髓膜炎等。尿常規檢查有助於鉤端螺旋體病和流行性出血熱的診斷,大便常規檢查有助於感染性腹瀉的診斷。生化檢查有助於病毒性肝炎的診斷。
6.4病理學檢查因傳染病死亡的畜禽,都有一定的病理變化。可作為診斷的依據。有些病,如豬瘟、ND、IBD、MD和豬喘氣病等具有特徵性病理變化,有很大的診斷價值。
6.5病原學檢查6.5.1病原體的直接檢出許多傳染病可通過顯微鏡或肉眼檢出病原體而確診。如勾體、鏈球菌病。
HIV模型圖
病原學檢查6.5.2病原體分離a.細菌、螺旋體通常可用人工培養基分離培養,如傷寒桿菌、痢疾桿菌、鉤端螺旋體。B.立克次體則需要動物接種或組織培養才能分離出來,如斑疹傷寒。C.病毒分離一般需用組織培養。用以分離病原體的檢材可采自血液、尿、糞、皮疹等。採集標本時應注意病程階段,有無應用過抗微生物藥物,及標本的保存與運送。
致病菌的檢驗程式
正常細胞CPE
狂犬病毒包涵體(Negribody)
巨細胞病毒包涵體
病毒的快速診斷雜交PCR
6.5.3分子生物學檢測利用同位素或生物素標記的分子探針可以檢出特異性的病毒核酸如乙型肝炎病毒DNA,或檢出特異性的毒素如大腸桿菌腸毒素。
分子生物學檢測多聚酶鏈反應(PCR)能把標本中的DNA分子擴增100萬倍以上,用於肝炎病毒和其他病原體核酸檢測,可顯著提高靈敏度。
6.6免疫學檢測應用已知抗原或抗體檢測血清或體液中的相應抗體或抗原,是最常用的免疫學檢查方法,若能進一步鑒定其抗體是屬於IgG或IgM型,對近期感染或過去發生過的感染有鑒別診斷意義。免疫學檢測還可用於判斷受檢者的免疫功能是否有所缺損。
6.6.1特異性抗體檢測又稱血清學檢查。在傳染病早期,特異性抗體在血清中往往未出現或滴度很低,而在恢復期或後期則抗體滴度有顯著升高,故在急性期及恢復期雙份血清檢測其抗體由陰性轉為陽性或滴度升高4倍以上時往往有重要的意義。過去感染過某病原體或曾接受預防接種者,再感染另一病原體時,原有抗體滴度亦可升高(回億反應),但雙份血清抗體滴度升高常在4倍以下,可鑒別。特異性IgM型抗體的檢出有助於現存或近期感染的診斷。
特異性抗體檢測特異性抗體檢測方法很多:凝集反應,常用於檢測傷寒、副傷寒、布病。沉澱反應使用可溶性抗原,進行瓊脂擴散、對流免疫電泳等補體結合反應利用常用於病毒感染的診斷。中和反應。
特異性抗體檢測酶聯免疫吸附測定具有靈敏度高和操作簡便,設備條件要求較低的優點,易於推廣應用。
特異性抗體檢測免疫螢光,具有快速診斷的作用。放射免疫測定(RIA)有靈敏度和特異性較高的優點但設備條件要求較高。
6.6.2特異性抗原檢測病原體特異性抗原的檢測有助於在病原體直接分離培養不成功的情況下提供病原體存在的直接證據。其診斷意義往往較抗體檢測更為可靠。例如在乙型肝炎病毒分離培養還未成功時,乙型肝炎表面抗原的檢出即可給診斷提供明確根據。大多數用以檢測抗體的方法都可用於檢測抗原,其原理相同,僅方法有所改進。如反向被動血凝法檢測未知抗原用以診斷乙型肝炎、FMD。又如用免疫電鏡法以已知抗體檢測糞便中未知抗原來診斷輪狀病毒感染等。
豬瘟病毒感染細胞螢光染色
6.6.3免疫學檢測皮膚試驗用特異性抗原作皮內注射
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