抗生素类药物的分析.ppt

水解产物01坂口反应03甲基葡萄糖胺反应02麦芽酚反应UV4.链霉素在230nm处有紫外吸收庆大霉素无紫外吸收二、鉴别试验茚三酮反应（一）△硫酸庆大霉素的鉴别：取本品约5mg，加水1ml溶解后，加0.1%茚三酮的水饱和正丁醇溶液1ml与吡啶0.5ml，在水浴中加热5分钟，即呈紫蓝色坂口反应链霉胍特有反应（或α-萘酚）（二）方法：取本品0.5mg，加水4ml溶解，加氢氧化钠试液2.5ml与0.1%8-羟基喹啉的乙醇溶液1ml，放冷至15℃，加次溴酸钠试液3滴，即显橙红色麦芽酚反应麦芽酚反应（三）链霉糖特有反应（三）麦芽酚反应链霉糖特有反应H+分子重排硫酸链霉素的反应：取本品约20mg，加水5ml溶解后，加氢氧化钠溶液0.3ml，置水浴上加热5分钟，加硫酸铁铵溶液0.5ml，即显紫红色N-甲基葡萄糖胺反应（四）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物对二甲氨基苯甲醛H+红色（五）硫酸盐的鉴别反应H+TLC法（六）P195：硫酸庆大霉素的鉴别三、特殊杂质检查及组分分析链霉素杂质链霉素B（水解后为甘露糖、链霉素）3.方法TLC中的对照品法来源反应中间体特点活性仅为链霉素的20%-25%4.β-内酰胺环的不稳定性不稳定性因素四元环张力大酰胺键易水解4.β-内酰胺环的不稳定性稳定性与含水量和纯度密切相关干燥纯净条件下，较稳定室温保存3年以上；60℃保存6周；150℃1.5小时后降解水溶液不稳定：青霉素水溶液在pH6-6.8时较稳定；酸、碱、青霉素酶、金属离子、氧化剂作用下变质例青霉素的降解反应青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑酰基羟胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2二、鉴别（一）显色反应1.羟肟酸铁反应β-内酰胺类NaOH呈色硫酸铁铵试液H+2.双缩脲反应（开环分解）β-内酰胺类似肽键2.茚三酮反应△α-氨基3.与重氮苯磺酸反应头孢哌酮（偶合）（二）沉淀反应青霉素盐的沉淀反应沉淀在过量HCl或有机溶剂（乙醇、三氯甲烷、乙醚）中溶解2.重氮化-偶合反应重氮化-偶合反应芳伯氨基K+、Na+反应（三）焰色→鲜黄色+醋酸氧铀锌→↓黄Na+焰色→紫色+0.1%四苯硼钠+Ac→↓白K+取本品，加醋酸-醋酸钠缓冲液制成每1ml中含50微克的溶液，量取10ml，在水浴中加热30分钟，立即冷却，以未加热的供试品缓冲液做空白，在339nm波长处有最大吸收，吸光度约为0.6（四）UV法（五）药典对本类抗生素的鉴别几乎均采用该法IR法对照品对照法色谱法（五）1、TLC法2、HPLC法1头孢他啶、头孢曲松钠、头孢哌酮钠等规定了各自聚合物的检查分子排阻色潽法、离子交换色谱法、反相色谱法高分子杂质检查青霉素钠吸光度：取本品，加水制成每1ml中含1.80mg的溶液，照紫外-可分光光度法，在280nm的波长处测定吸光度，不得大于0.10；在264nm的波长处有最大吸收，吸光度应为吸光度检查2三、特殊杂质的检查01微生物检定法02汞量法03HPLC四、含量测定（一）汞量法1.原理（水解）青霉素与汞盐不反应，降解产物青霉噻唑酸及其继续水解生成的青霉素胺与汞盐反应，据此可测得降解杂质的含量氢化噻唑环开环形成巯基化合物与汞定量反应，可测得总青霉素含量青霉素钠含量测定方法取本品约50mg，精密称定，加水5ml溶解后，加1mol/L氢氧化钠溶液5ml，摇匀，放置15分钟，加1mol/L硝酸溶液5ml，醋酸盐缓冲(pH4.6)20ml及水20ml，摇匀，照电位滴定法，在35～40℃，用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)缓慢滴定（控制滴定过程约为15分钟）。每1ml硝酸汞滴定(0.02mol/L)相当于7.128mg的总青霉素另取本品约0.5g，精密称定，加水与上述醋酸盐缓冲液各25ml，振摇使完全溶解，在室温下，立即用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)滴定，终点判断方法同上。每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相当于7.128mg的降解物。总青霉素的百分含量与降解物的百分含量之差值即为青霉素的含量。含量特点