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取培养物直接测定病毒数量将细胞裂解后测定病毒的数量。前期可将培养物先离心去上清以消除未吸附病毒的影响。将培养物过滤去细胞后测定病毒数量裂解量:每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。其值等于潜伏期受染细胞的数目除以稳定期受染细胞所释放的全部子代病毒数目,即等于稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比。潜伏期、裂解期、平稳期病毒感染的起始复制周期(replicativecircle)或称复制循环自病毒吸附于细胞开始,到子代病毒从感染细胞释放到细胞外的病毒复制过程。①吸附;②侵入;③脱壳;④病毒大分子的合成,包括病毒基因组的表达与复制;⑤装配与释放;病毒的复制周期第一节遗传的物质基础01第二节微生物的基因组结构02第三节质粒和转座因子03第四节基因突变及修复04第五节细菌基因转移和重组05第六节真核微生物的遗传学特性06第七节微生物育种07第八章微生物遗传证明核酸是遗传物质基础的三个经典实验DNA作为遗传物质(2个)经典转化实验(transformation):F.Griffith,噬菌体感染实验RNA作为遗传物质(1个)植物病毒的重建实验朊病毒的发现与思考第一节遗传的物质基础概念基因组(genome):一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称。原核生物(如细菌),多为单倍体(在一般情况下只有一条染色体)真核微生物,多条染色体,例如啤酒酵母有16条染色体。有时为双倍体。第二节微生物的基因组结构第二节微生物的基因组结构二、微生物与人类基因组计划人类基因组计划(HumanGenomeProject)1985年提出;1990年正式开始实施;2003年完成基因组测序;后基因组时代(PostgenomeEra)第二节微生物的基因组结构1)染色体为双链环状的DNA分子(单倍体);2)基因组上遗传信息具有连续性;基因数基本接近由它的基因组大小所估计的基因数一般不含内含子,遗传信息是连续的而不是中断的。3)功能相关的结构基因组成操纵子结构;4)结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝;5)基因组的重复序列少而短;个别细菌(鼠伤寒沙门氏菌和犬螺杆菌)和古生菌的rRNA和tRNA中也发现有内含子或间插序列三、微生物基因组结构的特点1、原核生物(细菌、古生菌)的基因组操纵子(operon):功能相关的几个基因前后相连,再加上一个共同的调节基因和一组共同的控制位点(启动子、操作子等)在基因转录时协同动作。优点:短时间内大量合成核糖体。真核微生物(啤酒酵母)的基因组1典型的真核染色体结构;1997年完成测序,大小为13.5×106bp,分布在16条染色体中。2没有明显的操纵子结构;3有间隔区(即非编码区)和内含子序列;4重复序列多;5三、微生物基因组结构的特点第二节微生物的基因组结构第三节质粒和转座因子01020304质粒(plasmid):转座因子(transposableelement):一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质遗传因子,主要存在于各种微生物细胞中。位于染色体或质粒上的一段能改变自身位置的DNA序列,广泛分布于原核和真核细胞中。05质粒和转座因子是细胞中除染色体以外的另外二类遗传因子第四节基因突变及修复01一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变。基因突变:基因突变020304狭义:点突变广义:点突变和染色体畸变细菌的遗传转化细菌的转导细菌的接合作用基因定位和基因测序微生物进行的水平方向的基因转移,并通过重组以适应环境。第五节细菌基因转移和重组参见p225证实接合过程需要细胞间的直接接触的“U”型管实验(BernardDavis,1950)(大肠杆菌的接合机制)机制接合作用是由一种被称为F因子的质粒介导F因子的分子量通常为5×107,上面有编码细菌产生性菌毛(sexpili)及控制接合过程进行的20多个基因。含有F因子的细胞:“雄性”菌株(F+),其细胞表面有性菌毛不含F因子的细胞:“雌性”菌株(F-),细胞表面没有性菌毛F因子的四种细胞形式01020304F-菌株:不含F因子,没有性菌毛,但可以通过接合作用接收F因子而变成雄性菌株(F+);Hfr菌株:F因子插入到染色体D
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