核酸蛋白质的生物合成.pptVIP

第十五章DNA、RNA和

蛋白质的生物合成;复制—以原来的DNA分子为模板，合成出相同分子的过程。

转录—在DNA分子上合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA的过程。

翻译—在RNA的控制下，根据核酸链上每三个核苷酸决定一个氨基酸的三联体密码规那么，合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质肽链的过程。;15.1DNA的复制;1958年M.Meselson和F.Stahl

Radioisotopelabelin〔放射性同位素标记〕anddensitygradient〔密度梯度离心〕centrifugationclearlydistinguishesreplicationsofsemiconservativefromconservative.;二、半保存复制的意义;DNA复制时顺着解链方向而生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为前导链。另一条子链复制的方向与解链方向相反，复制是不连续的，称为随从链。这种复制方式称为半不连续复制。

随从链上不连续复制的DNA片段称为岗崎片段。每一个岗崎片段5’-端都带有一个RNA引物。

;随从链复制时必须等待模板链解开足够长度时，才能从5′→3′合成引物后开始复制。延伸时，又要等待下一段暴露出足够长的模板，才能再次合成引物而延长。

;参与DNA复制的酶类和蛋白质;1.DNA聚合酶〔DNA-polymerase〕

DNA聚合酶能催化四种脱氧核糖核苷三磷酸合成DNA;①原核细胞的DNA聚合酶

DNA聚合酶I〔polI〕—Kornberg酶;3`-5`

核酸

外切酶

活力;DNA聚合酶Ⅱ〔polⅡ〕

DNA聚合酶活力：需带有缺口的DNA的双链作引物，主要参与DNA的修复。

3`-5`核酸外切酶活力

DNA聚合酶Ⅲ〔polⅢ〕

α亚基有DNA聚合酶活力；

ε亚基有3`-5`核酸外切酶活力，起校对作用；

θ亚基起组建复合物的作用；

DNA聚合酶Ⅳ、Ⅴ

DNA的错误倾向修复：修复缺乏准确性，出现高突变率。;大肠杆菌中DNA聚合酶的性质比较;②真核细胞的DNA聚合酶;2.DNA连接酶〔DNAligase〕;3.与DNA解旋和解链有关的酶和蛋白质：

解螺旋酶〔helicase〕

DNA拓扑异构酶〔DNAtopoisomerase〕

单链DNA结合蛋白〔singlestrandedDNAbindingprotein，SSB〕;〔1〕解螺旋酶;〔2〕单链结合蛋白〔SSB〕;拓扑异构酶I：

切断DNA双链中的一条链，使DNA解旋中不致打结，适当时再把切口封闭，反响不耗能。;在复制过程中，DNA每复制10bp，复制叉前方的模板DNA双螺旋就要绕其长轴旋转一周，产生正超螺旋。;三种酶催化生成磷酸二酯键的比较

提供核糖3’-OH结果

DNA聚合酶在引物作用下（dNMP）n+1

延长新链

连接酶连接不连续的不连续→连续链

两条单链连接双链DNA的单链缺口

拓扑酶切断两链再连接改变拓扑状态

;4.引物酶和引发体;15.1.3DNA的复制过程;(1)复制的起点和方向;DNA复制的方向

双向复制

单向复制;

酶或蛋白质;〔2〕起点的识别和双链的解开

;复制的起始：起始复合物的关键成分是DnaA蛋白。DnaA蛋白四聚体在ATP参与下结合于OriC的9bp重复顺序结合。然后DnaB蛋白四聚体在DnaC蛋白的参与下和这个区域结合，DnaB蛋白是一种解螺旋酶，使双链解开形成复制泡和两个复制叉。多个SSB蛋白同时结合于解开的DNA单链局部，稳定单链DNA。其间TOPⅡ用来消除DnaB解螺旋形成的扭曲张力。;

酶或蛋白质;〔3〕RNA引物的合成：DNA复制的起始的起始阶段需要在引发体〔primosome〕作用下合成RNA引物。引发体是由DnaB、DnaC、DnaT、PriA、PriB、PriC与引物酶构成的复合体，可按5ˊ→3ˊ方向合成约10～