生长与环境影响.ppt

微生物免除高浓度重金属离子毒害的机理通过改变细胞膜透性，阻止金属离子进入细胞例如，在酸性矿泉水里生长的真菌，在pH为2～3时，即使CuSO4的浓度达到lmol／L，也不能进入细胞。而当pH中性时，真菌对(4×10-5)mol／LCuSO4也敏感。这表明真菌对Cu2+的抗性与环境中pH变化有密切关系。产生某种螯合剂，抵抗金属离子的毒害微生物能产生某种螯合剂，抵抗金属离子的毒害。例如砷、锑等金属，可以在细胞内或细胞外，与微生物产生的螯合剂形成复合物，避免这些金属使酶失活或不被微生物细胞吸收。3.通过酶促反应，使有毒物质转变成无毒化合物HgCl2是和细胞酶蛋白的巯基结合使酶失活。一些微生物可以由甲基钴胺素作辅酶及提供甲基，使HgCl2转变成甲基汞或二甲基汞，不再与巯基结合，避免了毒害作用，甲基汞可被假单胞菌、金黄色葡萄球菌及肠道细菌还原成金属汞。7.4环境微生物的检测微生物是微生物环境工程的核心，微生物的监测分析方法十分重要。微生物的存在离不开环境，而微生物的数量分布和种群组成、理化性状、遗传变异等，又是环境状况的综合而客观的反映。利用微生物监测环境污染，通常有生态学监测法、生理生化监测法和毒理学监测法等。选用适当的方法，可了解不同污染状况及其近期、远期影响。新理论、新技术的渗透和应用，使监测方法不断完善、革新，更为灵敏、快速、准确。7.4.1细菌形态学检查蛍光顕微照片（BX50OLYMPUS）相位差顕微照片（BX50OLYMPUS）染色法光学照片1、光学显微镜检查染色法：由于细菌细胞微小而透明，往往需经染色才能用显微镜观察，染色前要进行干燥固定，致使测得的菌体大小小于活菌体。若采用负染色法，使背景着色，衬托菌体，则标本会大于活菌体。相位差显微镜：普通光学显微镜观察未经染色的标本（如活细胞）时，其形态和内部结构难以辨认。细胞各部分的密度和厚度不同使光程和折射率不同，光线通过后会产生相位差。相位差显微镜可将相位差转变成人眼可察觉的振幅差（明暗差），是显微技术的一大突破，该项技术的发明(F.Zernike)获得了1953的诺贝尔物理学奖。荧光显微镜：利用某些物质在紫外线照射下会发出荧光，在黑暗的背景下表现为光亮的物体的原理实现成像。对任何显微镜来说，分辨率是其观察效果的最重要的指标。光学显微镜分辨率受光干涉现象所制约有如下极限：分辨率(最小可能分辨距离)= λ:光源波长（最短可见光波长为450nm)β：试样与物镜间介质的折射率(高折射率的香柏油为1.52）?：物镜镜口角的半数（与物镜直径和与试样间工作距离有关，没有改进空间）一般认为，以可见光为光源时，分辨率不大可能超过0.18微米，而且人肉眼正常分辨能力为0.25毫米左右，进一步提高光学显微镜的放大倍数意义不大，因此目前光学显微镜总放大倍数只能达到1000-1500倍。0.5λβsin?2、透射电子显微镜工作原理与光学显微镜极为相近，但以更短波长的电磁波取代可见光，是目前分辨率最高的显微镜（1933年德国人E.Ruska制成第一台,1986获诺贝尔物理学奖）。芽胞原生质内膜芽胞壁皮质外壳外膜外壁1）负染技术用电子密度高本身与样品几乎不反应的物质（多为重金属盐）来对样品“染色”。这些金属盐不被样品成分吸附，而是沉积到样品周围或样品表面上凹陷的部分，从而以散射电子能力的差异把样品的外形与表面结构清楚的衬托出来。制样方法2）超薄切片技术取样固定脱水渗透包埋切片染色观察电子束的透射能力较弱，观察细胞内部结构时，必须制作成100nm以下厚度的切片。基本步骤如下SEM工作原理类似电视，电子枪发出的电子束被磁透镜会聚成极细的电子探针，对样品进行扫描，激发样品表面放出二次电子(也有其他信号)。二次电子多少与电子束的入射角有关，即与样品表面形貌有关。在观察用荧光屏上有一个电子束做同步扫描。用二次电子放大信号对荧光屏电子束的强度进行控制，还原形成样品的立体形貌图像。图像的景深很好，可观察立体结构。3.扫描电子显微镜(scanningelectronmicroscope)溶藻細菌N-14株的電子顕微鏡照片乳酸菌的扫描电子显微镜（SEM）照片电子显微镜与后面将要介绍的探针扫描显微镜相比较，最大的缺陷是需要对样品进行表面处理，特别是表面导电性较差的样品。水処理担体AQ-7扫描电子显微镜（SEM）的样品制备样品制备的主要目的是便于观察，但高保真是样品制备技术好坏的基