临床病原学检查.pptx

临床病原学检查

○不同病原体(细菌、螺旋体、支原体、放线菌、

衣原体、立克次体、病毒、真菌、原虫、蠕虫

)所致感染性疾病的实验诊断方法各有其特点，

但几乎都遵循以下基本原则：①正确、规范采

集和运送标本；②通过直接显微镜查见病原体

或检出病原体抗原成分；③借助分子生物学的

方法检测病原体核酸；④利用免疫学方法检测

机体对病原体抗原成分产生的免疫产物；⑤对

病原体进行分离与鉴定。在完成病原体的检出

和鉴定任务后，结合病人的病史、症状或体征，

快速作出诊断。并积极参与临床选择抗微生物

药物，指导和监控微生物的治疗方案，避免耐

药菌株的产生。

○标本采集和运送：

○根据各种病原体所致感染性疾病的病程确定

标本采集的时间、部位和种类。所有采集的

标本均置于无菌或清洁容器中，不能接触消

毒剂和抗菌药物。标本必须注明姓名、年

龄、性别、采集日期、临床诊断、检验项目

等。标本采集后应按要求处理，立即送往病

原学实验室，对于烈性传染病材料的运送需

专人护送。

0(一)血液标本

疑为菌血症、败血症和脓毒血症患者，一般

在发热初期和高峰期采集，如已用抗菌药物

治疗者，则在下次用药前采集。采样以无菌

法由肘静脉穿刺，成人每次10-20ml,婴儿

和儿童为1-2ml,血液置于盛有抗凝剂聚茴

香脑磺酸钠无菌瓶中送检。大多数菌血症呈

周期性，故血标本也需在24h内周期性收集，

一般24h内收集2-3次血标本分别培养。

0(二)脑脊液与其他无菌体液标本

无菌采集脑脊液，脑脊液通常离心10000×g

IOmin,取沉淀作显微镜检查。引起脑膜炎的

病原体脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜

血杆菌等其抵抗力弱，不耐冷、容易死亡，

故采集的脑脊液应立即保温送检或床边接种。

胸水、腹水和心包液等因标本含菌量少宜采

集较大量标本送检以保证检出Tc

(六)泌尿生殖道标本

根据不同疾病的特征及检验目的采集不同标

本，如性传播性疾病常取尿道口分泌物、外

阴糜烂面病灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌

物和前列腺液等。对生殖道疱疹常穿刺疱疹

液，盆腔脓肿者则于直肠子宫陷凹处穿刺脓

液。怀疑衣原体感染的标本不应使用木柄拭

子，因为木质对该病原体有毒性作用。除淋

病奈瑟菌保温送检外，所有标本收集后40℃

保存直至培养。

(七)创伤、组织和脓肿标本

对损伤范围较大的创伤，应从不同部位采集多份标

本。采集部位应首先清除污物，以碘酒，酒精消毒皮

肤，防止表面污染菌混入标本影响检测结果。开放

性脓肿的采集，用无菌棉拭采取脓液及病灶深部分泌

物。封闭性脓肿，则以无菌干燥注射器穿刺抽取；疑

为厌氧菌感染者，取脓液后立即排净注射器内空气，

针头插入无菌橡皮塞送检，否则标本接触空气导致厌

氧菌死亡而降低临床分离率。用于病毒检测的组织

标本宜放在有灭菌盐水纱布的培养皿内或病毒运送

培养基内运送，用匀浆管匀浆、离心、过滤后，作病

毒分离鉴定。

(八)血清标本

用于检测患者特异性抗体效价以辅助诊断感

染性疾病。采集血液置无菌试管中，自然

凝固、血块收缩后吸取血清，56℃加热

30min以灭活补体成分。灭活血清保存于一

20℃。

■检测方法

由实验技术直接或间接获得病原体及病原体

结构成分，是确诊感染性疾病的一个重要依

据。临床实验室中细菌性疾病以培养分离技

术为主，病毒性疾病以免疫学方法为主。

■(一)直接显微镜检查

■标本直接涂片、干燥、固定后染色，或经离心浓缩

集菌，涂片染色，置光学显微镜下观察病原体的形

态、染色性或观察宿主细胞内包涵体的特征。另一

种方法是采用悬滴法或压滴法，在不染色状态下借

助暗视野显微镜或相差显微镜观察病原体的生长、

运动方式、螺旋体形态和运动。湿式涂片有助于寄

生虫虫卵检查。直接镜检结果对病原学诊断具有一

定意义，尤其是无菌体液的直接镜检更具有诊断价

值，如脑脊液涂片中查见革兰染色阴性肾形双球

菌，结合患者发热、喷射状呕吐、剧烈头痛和脑膜

刺激体征，可作出流行性脑脊髓膜炎的诊断。

那些有正常菌群寄居的腔道分泌物，涂片镜检虽不

能确定诊断，但对进一步检出的步骤、采用的方法

和分离鉴定病原体所需培养基有重要提示作用，如

在米泔水样便的悬滴片动力检查，发现有运动活泼

的鱼群样弧菌，常提示弧菌科细菌感染，