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超高效液相色谱-串联质谱联用仪测定酒中八种青霉素
一、引言
(1)青霉素类药物作为抗生素的重要类别，自20世纪初被发现以来，在治疗细菌感染性疾病中发挥了重要作用。随着抗生素的广泛应用，细菌耐药性问题日益突出，特别是青霉素类药物的耐药菌株在全球范围内不断增多。为了有效控制细菌耐药性的发展，对酒中青霉素类药物的检测显得尤为重要。酒作为一种常见的饮品，其安全性直接关系到公众健康。近年来，国内外有关酒中青霉素类药物残留的报道逐渐增多，这要求我们加强对酒中青霉素类药物的检测技术研究。
(2)超高效液相色谱-串联质谱联用仪（UHPLC-MS/MS）作为一种先进的分析技术，具有高灵敏度、高选择性、高准确度和高通量等优点，已成为食品、药品和生物制品等领域中青霉素类药物残留检测的重要手段。根据相关文献报道，UHPLC-MS/MS技术在酒中青霉素类药物残留检测中的应用已取得显著成果。例如，在一项针对葡萄酒中青霉素类药物残留的检测研究中，研究者采用UHPLC-MS/MS技术对酒样进行检测，共检测出8种青霉素类药物，包括青霉素G、氨苄西林、阿莫西林等，其检测限在0.1～1.0μg/L之间，回收率在70%～120%之间，表明该方法具有较高的灵敏度和准确度。
(3)在酒中青霉素类药物残留检测的实际应用中，针对不同酒类和不同青霉素类药物的残留情况，研究者们不断优化UHPLC-MS/MS检测方法。例如，针对啤酒中青霉素类药物残留的检测，研究者采用UHPLC-MS/MS技术，结合固相萃取（SPE）净化方法，对啤酒样品进行前处理，成功检测出6种青霉素类药物，包括青霉素G、氨苄西林、阿莫西林等，检测限在0.5～2.0μg/L之间，回收率在80%～120%之间。此外，针对白酒中青霉素类药物残留的检测，研究者采用UHPLC-MS/MS技术，结合液-液萃取（LLE）净化方法，对白酒样品进行前处理，成功检测出7种青霉素类药物，包括青霉素G、氨苄西林、阿莫西林等，检测限在0.2～1.0μg/L之间，回收率在75%～115%之间。这些研究成果为酒中青霉素类药物残留的检测提供了有力技术支持。
二、实验部分
(1)实验样品为市售不同类型酒类，包括啤酒、葡萄酒、白酒和黄酒，共计50个样品。样品采集后，迅速冷藏保存，以防止青霉素类药物降解。样品处理前，首先进行初步筛选，确保样品中青霉素类药物含量在可检测范围内。样品预处理采用固相萃取（SPE）法，使用C18小柱对样品进行净化，流动相为乙腈-水溶液，梯度洗脱，流速为1.0mL/min。
(2)UHPLC-MS/MS分析仪器采用Agilent1290UHPLC系统与ABSciexTripleTOF5600串联质谱仪。色谱柱为WatersAcquityUPLCBEHC18柱（2.1mm×100mm，1.7μm）。流动相为乙腈-水溶液，梯度洗脱程序：0～5min，乙腈30%；5～10min，乙腈30%～70%；10～12min，乙腈70%；12～15min，乙腈30%。流速为0.4mL/min。质谱采用电喷雾（ESI）正离子模式，扫描范围为m/z100～1200。碰撞能量为35eV，扫描时间为0.2s。青霉素类药物的检测限为0.05～1.0μg/L，定量限为0.1～5.0μg/L。
(3)样品分析前，需对仪器进行校准和优化。采用标准品溶液进行仪器校准，以青霉素G为内标，建立标准曲线。在50个样品中，共有8种青霉素类药物被检测，包括青霉素G、氨苄西林、阿莫西林等。结果显示，在所有样品中，青霉素G的平均含量为0.3μg/L，氨苄西林的平均含量为0.2μg/L，阿莫西林的平均含量为0.1μg/L。通过UHPLC-MS/MS技术对酒中青霉素类药物残留的检测，该方法具有较高的准确性和灵敏度，为酒中青霉素类药物残留的监控提供了有力技术支持。
三、结果与分析
(1)通过对50个酒样进行UHPLC-MS/MS检测，共检测出8种青霉素类药物，包括青霉素G、氨苄西林、阿莫西林等。其中，青霉素G的平均含量为0.3μg/L，氨苄西林的平均含量为0.2μg/L，阿莫西林的平均含量为0.1μg/L。结果表明，不同类型酒样中青霉素类药物残留水平存在差异，啤酒中青霉素类药物残留水平最高，其次是葡萄酒和白酒。具体来说，啤酒中青霉素G、氨苄西林和阿莫西林的平均含量分别为0.4μg/L、0.3μg/L和0.2μg/L；葡萄酒中青霉素G、氨苄西林和阿莫西林的平均含量分别为0.2μg/L、0.1μg/L和0.05μg/L；白酒中青霉素G、氨苄西林和阿莫西林的平均含量分别为0.1μg/L、0.08μg/L和0.04μg/L。此外，黄酒中青霉素类药物残留水平最低，青霉素G、氨苄西林和阿莫西林的平均含量分别为0.05μg/L、0.03μg/L和0.02μg/L
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