SARS-CoV-2触发肥大细胞脱颗粒诱导组织炎症损伤的细胞学机制.pdfVIP

摘要

SARS-CoV-2爆发以来，全球已超过6.7亿人感染，死亡人数超过680万。

COVID-19患者出现包括呼吸系统、神经系统、心血管系统在内的多器官功能衰

竭甚至死亡。SARS-CoV-2感染诱导的细胞因子风暴是导致多器官损伤或死亡的

重要因素。SARS-CoV-2感染后，在COVID-19患者血清中细胞因子和趋化因子

异常升高。但SARS-CoV-2诱发机体细胞因子风暴机制尚不清楚，限制了对病

毒致病机理的阐述及免疫调节剂的研发和试用。

肥大细胞分布于宿主-外界接触的黏膜及内脏组织，是过敏反应的主要效应

细胞。除此之外，肥大细胞还表达多种膜受体和免疫传感器，可识别多种病原

体，被激活后可通过脱颗粒依赖或脱颗粒非依赖性途径诱导炎症因子的分泌，

构成了抗病原体的第一道防线。COVID-19患者尸检结果表明肺部有肥大细胞聚

集和脱颗粒现象，表明肥大细胞可能在SARS-CoV-2发病机制中具有潜在作用。

因此本研究利用人肥大细胞系、ACE2人源化小鼠以及恒河猴感染模型进一步验

证SARS-CoV-2诱导肥大细胞脱颗粒作用，及其所诱发的细胞因子风暴对肺、

脑组织损伤的作用；探讨临床变应性药物依巴斯汀和氯雷他定可否作为肥大细

胞免疫调节剂阻断SARS-CoV-2诱导的炎症反应，以及变应性药物联合抗病毒

药物治疗COVID-19的可能性；最后，还利用肥大细胞系LAD2全面探究冠状

病毒Spike蛋白诱导肥大细胞脱颗粒的分子机制。本研究主要获得以下几个方面

结果：

1、SARS-CoV-2可通过触发肥大细胞脱颗粒诱导肺、脑炎症损伤

SARS-CoV-2可诱导ACE2人源化小鼠和恒河猴肺部的肥大细胞脱颗粒，以

及肺部炎症和损伤。Spike-RBD蛋白与细胞表面受体ACE2结合便可快速诱导肥

大细胞脱颗粒，脱颗粒成分包括组胺，类胰蛋白酶和类糜蛋白酶；Spike-RBD

蛋白诱导肥大细胞脱颗粒产物可改变肺上皮细胞A549的多种信号通路，其中包

括抗病毒免疫反应相关基因，促炎细胞因子和趋化因子，金属肽酶编码基因的

表达上调以及细胞连接和细胞周期/分裂相关基因表达下调；还可使肺微血管内

皮细胞HULEC-5a促炎细胞因子和趋化因子的相关基因显著上调。

另外，SARS-CoV-2还可诱导小鼠产生病毒性脑炎和肥大细胞在脑血管周围

聚集；Spike-RBD蛋白触发的肥大细胞脱颗粒可诱导脑微血管内皮细胞炎症反

应并破坏紧密连接的表达；其还可诱导小胶质细胞的激活并引起炎症反应。

2、变应性药物依巴斯汀和氯雷他定可抑制肥大细胞脱颗粒，保护肺炎症损

伤

变应性药物依巴斯汀和氯雷他定一方面可作为肥大细胞稳定剂阻断Spike-

RBD蛋白诱导肥大细胞脱颗粒；使用依巴斯汀或氯雷他定通过抑制肥大细胞脱

颗粒可降低A549的炎症反应和保护紧密连接蛋白的表达；另外依巴斯汀和氯雷

他定也可作为抗组胺药物降低由肥大细胞脱颗粒引起的HULEC-5a的炎症反应

并保护黏附蛋白的表达。在ACE2人源化小鼠模型中也发现依巴斯汀和氯雷他

定可降低肺部肥大细胞聚集和脱颗粒，降低炎症反应，保护肺损伤。当氯雷他

定和抗病毒药物瑞德西韦联合给药时，不仅可有效降低小鼠肺部病毒载量，还

能更大程度的降低肺部炎症反应，保护肺损伤。

3、冠状病毒Spike蛋白通过激活PI3K/AKT通路增加胞内Ca2+浓度诱导肥

大细胞脱颗粒

除了SARS-CoV-2，其它冠状病毒SARS-CoV、MERS、HCoV-229E和

HCoV-NL63也可通过与其相应受体结合诱导肥大细胞脱颗粒，并且仅冠状病毒

Spike蛋白即可诱导肥大细胞产生炎症反应。涉及的分子机制为冠状病毒Spike

蛋白可通过激活PI3K/AKT通路增加胞内Ca2+浓度进而诱导肥大细胞脱颗粒，

且微管蛋白参与该过程。

综上所述，本研究揭示了SARS-CoV-2诱导炎症反应导致肺、脑组织损伤

的细胞学机制，并以“老药新用”的方式提出使用变应性药物联合抗病毒药物

用于治疗COVID-19的新策略。另外本研究还发现冠状病毒Spike蛋白诱导肥大

细胞脱颗粒的分子生物学共性机制，为冠状病毒乃至新发病毒的感染致病机制、

预防治疗等提供重要理论依据。

关键词：SARS-CoV-2，肥大细胞，炎症损伤，变应性药